1991 Fiscal Year Annual Research Report
下顎頭軟骨の骨化機構に関する発生学的、免疫組織化学的、超微細構造学的研究
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02404070
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| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
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Principal Investigator |
一條 尚 東京医科歯科大学, 歯学部, 教授 (20013807)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
柴田 俊一 東京医科歯科大学, 歯学部, 助手 (80187400)
大迫 正文 東京医科歯科大学, 歯学部, 助手 (60152104)
鹿野 俊一 東京医科歯科大学, 歯学部, 助手 (60114758)
寺島 達夫 東京医科歯科大学, 歯学部, 助教授 (20114770)
山下 靖雄 東京医科歯科大学, 歯学部, 教授 (70014157)
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| Keywords | 下顎頭 / 軟骨内骨化 / 石灰化 / 結晶 / 免疫組織 / 器官培養 / モノクロナ-ル抗体 |
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| Research Abstract |
1.下顎頭軟骨の初期石灰化部位における結晶の超微細構造に関する観察をおいて、種々の発育段階のラット下顎頭を摘出後、直ちに化学固定を行い、また一部には液体窒素を用いた急速凍結置換固定法を適用し、未脱灰のまま樹脂包埋を行い、超薄切片を作製した。その後、加速電圧300KVおよび200KVの超高圧透過電子顕微鏡を用いて、下顎頭軟骨初期石灰化部位に出現する結晶構造について、直接原子配列レベルでの観察を分解能をさらにあげておこなった。その結果、初期石灰化部位の結晶には構造原子の欠落や置換、さらにラセン転位などの多数の構造欠陥が存在することが明かとなった。
2.下顎頭の軟骨細胞及び軟骨基質を抗原とした単クロ-ン抗体の作製および免疫組織学的観察においては、ラット下顎頭軟骨全体のホモジネ-トを抗原として、BalbCマウスを免疫し、その脾細胞とNSー1細胞とを融合させ、ハイブリド-マを作成した。その結果、分化した軟骨細胞と特異的に反応する単クロ-ン抗体が数種類得られ、その局在に関して現在免疫電顕法で観察しているところである。また、軟骨基質に対する抗体を作製するために、下顎頭軟骨基質の構成成分を分離して、in vitroおよびin vivo免疫法を用いて、抗体の作製をすすめている。
3.下顎頭の器官培養法による下顎頭軟骨細胞の分化発育の観察に関して、マウス胎生16.5日齢の胎仔の下顎頭を、無菌的に適出し、アスコルビン酸および牛胎仔血清を添加したイシコフのMDMを培地として用いた場合、下顎頭軟骨の発育は進行するが、軟骨内骨化はほとんど進まないため、現在種々のホルモンや成長因子などを添加し、最適な培養条件を確立するため予備実験を繰り返している。
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[Publications] T.ICHIJO,Y.YAMASHITA,T.TERASHIMA: "A trial of three dimensional observation on the ultrastructure of human crystals." 解剖学雑誌誌. 66. 320 (1991)
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[Publications] 馬場 麻人,寺島 達夫,柴田 俊一,鹿野 俊一,大迫 正文,坂本 裕次郎,鐘濱,安石,新鞍 美保子,山下 靖雄,一條 尚: "ラット下顎頭軟骨に対するモノクロナ-ル抗体の作製." 歯科基礎医学界雑誌. 33(補冊). 176 (1991)
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[Publications] 一條 尚,山下 靖雄,寺島 達夫: "日立Hー9000形(300kv)透過電子顕微境を用いた歯と骨のapatile結晶の微細構造に関する観察" 口腔病学会雑誌. 58. 730 (1991)
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[Publications] S.Shibata,O.Baba,M.Ohsako,S.Shikano,T.Terashima,Y.Yamashita and T.Ichijo: "Histological observation of large light cells that seem to be surviving hypertrophic chondrocytes in the rat mandibular condyle." Archs oral Biol.36. 541-544 (1991)
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[Publications] S.Shibata,O.Baba,M.Ohsako,S.Suzuki,Y.Yamashita,T.Ichijo: "Ultrastructural observation on matrix fibers in the condylar cartilage of the adult rat mandible." Bull.Tokyo Med.Dent.Univ.38. 53-61 (1991)
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[Publications] T.Ichijo,Y.Yamashita,T.Terashima: "Observations on the structural features and characteristics of biological apatite crystalsーー1.Observation on the shape and arrangement of the cross sectioned enamel crystalsーー." Dentistry in Japan. 27. 11-16 (1990)
