骨軟部悪性腫瘍における造腫瘍性遺伝子変異の分子細胞遺伝学的解析

1992 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 02454339
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 阿部 周一 北海道大学, 理学部, 助教授 (80125278)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 野島 孝之 北海道大学, 医学部, 講師 (50142732) ; 松野 丈夫 北海道大学, 医学部, 助教授 (10165847) ; 吉田 廸弘 北海道大学, 理学部, 教授 (60001765)
• Keywords: 骨軟部悪性腫瘍 / 横紋筋肉腫 / ユーイング肉腫 / 特異的染色体転座 / 微小核融合 / 造腫瘍性検索 / 遺伝子再配列

Research Abstract

昨年度までに樹立した横紋筋肉腫株16例とユーイング肉腫株4例において、今年度は以下の結果を得た。
1)昨年度までに作成したヒト単一染色体保持マウス細胞クローンパネルからサイトカラシンB処理により微小核を作成し、胞巣型横紋筋肉腫のt(2;13)転座またはユーイング肉腫のt(11;22)転座保持細胞株と融合することにより、それぞれに単一2番染色体または11番染色体の移入を試みた。t(11;22)保持細胞への11番染色体の移入は、微小核の融合効率が悪く成功しなかった。一方、2番染色体の移入は1例のt(2;13)保持細胞株において成功し、8クローンが得られた。このうち、2つのクローンの造腫瘍性をヌードマウスにおいて検討したが、いずれも造腫瘍性を失うことはなかった。
2)t(2;13)転座切断点および近傍の遺伝子DNAプローブを用いたサザーン解析と染色体in situハイブリダイゼーションにより、この転座の切断点は、FN1(フィブロネクチン)とCOL6A3(コラーゲンIV型α3)遺伝子の間にあることが示唆された。なお、D2S3、FN1は、今回調べた11例の横紋筋肉腫では、転座の有無に係わらずRFLPsや再構成は認められなかった。一方、COL6A3、MYL1-3(ミオシン軽鎖)、ALPP(胎盤型アルカリフォスファターゼ)遺伝子は、11例中1例の正常核型症例でRFLPsが認められ、また、転座を持たない他の1例でもALPPにRFLPsが認められた。しかし、残りの症例ではこれらの遺伝子に変化がなかった。
3)t(11;22)転座切断点の解析により、11q23のFLI1と22q12のEWS遺伝子がユーイング肉腫4例中2例の転座症例において再配例していることが分かり、昨秋のフランスのグループによる報告を確認できた。ただ、RNAを用いたRT-PCR解析により新たな切断部位が1例に見つかり、両遺伝子の切断点は予想より広い領域に分布することが分かった。

Research Products

• [Publications] Hiroshi Sonobe: "Establishment and characterization of a new human synovial sarcoma cell line,HS-SY-II" Laboratory Investigation. 67. 498-505 (1992)
• [Publications] Takayuki Nojima: "Osteosarcoma resembling osteoblastoma and its hetero-transplantation into nude mice" Acta Pathologica Japonica. 42. 75-81 (1992)
• [Publications] Nanao Kamada: "Chromosome abnormalities in adrlt T-cell leukemia/lymphoma: a karyotype review committee report" Cancer Research. 52. 1481-1493 (1992)
• [Publications] Michihiro C.Yoshida: "Recent advances in fluorescence in situ hybrid-ization" Journal of Radiation Research (Supplement). 33. 54-60 (1992)
• [Publications] 阿部 周一: "上皮性分化を示す骨・軟部悪性腫瘍の染色体異常" 病理と臨床. 10. 1385-1390 (1992)
• [Publications] Takeo Matsuno: "Trends in Research and Treatment of Joint Diseases" Springer-Verlag,Tokyo, 182 (1992)