1992 Fiscal Year Annual Research Report
歯周病原性細菌の遺伝子解析に基づく歯周病の予防・診断・治療法の開発
| Project/Area Number |
02557073
|
|---|
| Research Institution | AICHI-GAKUIN UNIVERSITY |
|---|
Principal Investigator |
吉村 文信 愛知学院大学, 歯科部, 教授 (50001962)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
加藤 煕 北海道大学, 歯学部, 教授 (60001020)
中垣 晴男 愛知学院大学, 歯学部, 教授 (10097595)
池田 健 愛知学院大学, 歯学部, 講師 (80241131)
小佐野 悦雄 愛知学院大学, 歯学部, 講師 (80110998)
日比 栄子 愛知学院大学, 歯学部, 講師 (50097606)
|
|---|
| Keywords | 歯周病原性細菌 / 線毛 / 血球凝集素 / 外膜蛋白質 / ポルフィロモナスジンジバリス / 遺伝子 / 塩基配列の決定 |
|---|
| Research Abstract |
歯周病理原細菌であるPorphyromonas gingivalisの保有する病原因子(線毛・血球凝集素・表層蛋白質)の遺伝子を解析することによって歯周病の新しい予防、診断、治療法を開発することを目的としてきた。申請者らによって線毛を構成する主要蛋白質の遺伝子(fimA)はすでにクローン化され、塩基配例が決定されている。この遺伝子の上流に63K、下流の50Kおよび80K蛋白質をコードしている遺伝子がそれぞれあることを明らかにしてきたが、これら蛋白質に対する特異抗体を家兎抗体として調整した。50K蛋白質は、他の蛋白質の混入をふせぐために、C末端がちぎれた45K*蛋白質を合成するリコンビナントを使い、この蛋白質として精製した。45K*蛋白質は他の蛋白質よりかなり多量に合成されることから、より純度の高い標品が得られた。常法に従って家兎に免疫し、それぞれの特異抗体を得た。これらの抗体を使って、各蛋白質が菌体のどこに存在するのかをまず探索したところ、特に50K、80K蛋白質は、精製綿毛の分画に濃縮され、線毛を構成する微量成分であろうと考えられる実験結果を得た。すなわち、これら抗血清を使って、イムノ・ブロット法にて、本菌の各種分画中から、特異的に反応する蛋白質を探索したところ、精製線毛に存在する微量成分の、それぞれ50K、80Kに相当する蛋白質と反応し、それ以外の分画では反応する蛋白質を見つけられなかった。63K蛋白質の本菌における所在は決定できなかった。この蛋白質は本菌ではきわめて小量しか発現していなく、検出感度以下の量しか存在しない可能性も考えられる。塩基配列の決定は進展し、50K、80Kの蛋白質をコードする遺伝子の塩基配列に関してはほぼ完成しているが、なおまだ発表するまでに至っていない。本菌のプロテアーゼ活性をもった血球凝集素を均一に精製し、その遺伝子の一部をクローン化した。
|
Research Products
(4 results)
-
[Publications] Takahashi,Y.,F.Yoshimura,M.Kawanami,and H.Kato: "Detection of Fimbrilin Gene(fimA)in Porphyromonas(Bacteroides)qinqivalis by Southem Blot Analysis" J.Periodont.Res.27. 599-603 (1992)
-
[Publications] Watanabe,K.,T.Takasawa,F.Yoshimura,M.Ozeki et al.: "Molecular Cloning and Expressin of Porphyromonas(Bacteroides)qinqivalis Major Surface Protein(the 75 Kitodalton Protein・・・・・・・" FEMS Microbiol.Lett. 92. 47-56 (1992)
-
[Publications] Isogai,E.,H.Isogai,N.Fujii,K.Hirose et al.: "Fimbriae from Porphyromonas qinqivalis Induce Chemiluminescens Respsnce of Macrophage in a Different Manner・・・・・" Bifidobacteria Microflora. 11. 39-43 (1992)
-
[Publications] Yoshimura,F.(分担): "分担タイトル:Molecular Biology of Porphyromonas qinqivalis fimbriae Porphyromonas qinqivalis:Biology and Virulence" CRC Press, (1993)
