1991 Fiscal Year Annual Research Report
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03404003
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
杉浦 昌弘 名古屋大学, 遺伝子実験施設, 教授 (80027044)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
松林 徹 日本学術振興会, 特別研究院 (50222310)
若杉 達也 名古屋大学, 遺伝子実験施設, 助手 (10212317)
杉田 護 名古屋大学, 遺伝子実験施設, 助教授 (70154474)
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| Keywords | プラスチド / 光合成 / 遺伝子 / RNA結合タンパク質 / 葉緑体 / 転写後調節 / エキソン / イントロン |
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| Research Abstract |
プラスチドは光合成お物質生産を担う植物特有のオネガネラで独自のゲノムと完結した遺伝情報発現系をもつ。プラスチド遺伝子の発現制御は主として転写後(RNAレベル)で行われる。そこで、我々は転写後調節に関与すると考えられるRNA結合タンパク質を単離し、その遺伝子の構造と発現様式および機能の解析を進め、初年度は以下の成果を得た。
1)タバコ葉緑体の3種類の葉緑体RNA結合タンパク質(リボヌクレオプロテイン)cp28、cp31、cp33を無細胞RNAータンパク質合成系で合成し、それぞれの核酸歩合能を調べた。3種のタンパク質とも1本鎖DNAと強く結合するが、特にポリ(G)とポリ(U)と高い結合特異性を示した。
2)RNA結合タンバク質cp31の遺伝子を単離して、その全塩基配列を決定した。この遺伝子は4個のエキソンと3個のイントロンよりなり、転写開始後は翻訳開始点より168bp上流に存在する。転写産物の中にはオルタナティブ・スプライシングによるものは含まれていない。Nicotiana sylvestrisの核ゲノムにはこの遺伝子は1コピ-存在することが明らかとなった。
3)新たに2種の葉緑体RNA結合タンパク質cp29Aとcp29Bを同定し、各々のcDNAと遺伝子を単離・解析した。両者ともトランジト・ペプチド、酸性ドメイン、2個のRNA結合ドメインを持っていた。また両遺伝子は4個のエキソンと3個のイントロンより構成されていた。
4)以上5種のcpタンパク質に存在する10種のRNA結合ドメインの構造が明らかになったので、その系統樹を作製した。
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Research Products
(8 results)
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[Publications] 島田 浩章: "Fine structural features of the chloroplast genome:comparison of the sequenced chloroplast genomes." Nucleic Acids Research. 19. 983-995 (1991)
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[Publications] 横井 史章: "The chloroplast gene for ribosomal protein CL23 is functional in tobacco." FEBS Letter. 281. 64-66 (1991)
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[Publications] 李 育慶: "Tobacco nuclear gene for the 31 kd chloroplast ribonucleoprotein: genomic organization,Sequence analysis and expression." Nucleic Acids Research. 19. 2987-2991 (1991)
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[Publications] 李 育慶: "Nucleic acidーbinding specificities of tobacco chloroplast ribonucleoproteins." Nucleic Acids Research. 19. 2893-2896 (1991)
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[Publications] 蒙 冰原: "Two promoters within the psbKーpsbIーtrnG gene cluster in tobacco chloroplast DNA." Current Genetics. 20. 259-264 (1991)
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[Publications] 叶 麗珍: "Diversity of a ribonucleoprotein family in tobacco chloroplasts: two new chloroplast ribonucleoproteins and a phylogenetic tree of ten chloroplast RNAーbinding domains." Nucleic Acids Research. 19. 6485-6490 (1991)
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[Publications] 杉浦 昌弘: "In“Cell Culture and Somatic Cell Genetics of Plants",Vol.7A'The Molecular Biology of Plastids' Transcript processing in plastids: Trimming,cutting,splicing." Academic Press, 125-137 (1991)
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[Publications] 杉浦 昌弘: "In“Biotechnology Current Progress" Structural analysis of chloroplast DNA." Technomic Publishing Co., 337-354 (1991)
