1994 Fiscal Year Annual Research Report
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03404012
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
小川 智也 東京大学, 農学部, 教授 (30087572)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
林 良博 東京大学, 農学部, 教授 (90092303)
中原 悠子 理化学研究所, 細胞制御化学研究室, 先任研究員
高橋 迪雄 東京大学, 農学部, 教授 (30011943)
塩田 邦郎 東京大学, 農学部, 助教授 (80196352)
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| Keywords | 糖タンパク質 / GPIアンカー / スフィンゴ糖脂質 / PL-Im / 絨毛性性腺刺激ホルモン / 糖鎖 / ガングリオシド / Rcho-1 |
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| Research Abstract |
申請者らは、これまでに、糖タンパク質の糖鎖修飾に重要なGlc_3Man-OCH_2CH_2CH_3を合成し、糖分解酵素の糖鎖認識部位の特異性に対する立体構造の解析を行ってきた。また、微生物関連糖鎖として、新たな複合糖質構造として注目されているトリパノソーマ・ブルセイのGPIアンカーの糖鎖部分の中核7糖鎖の化学合成と、ヒト赤血球膜成分であるグリコホリンAのN端側ペンタペプチドの合成にモデル系で成功した。糖脂質では、グロボ系糖脂質、GD2、神経細胞表面に存在する糖エピトープである硫酸化グルクロン酸含有スフィンゴ糖脂質の化学合成に成功している。また、先に申請者らは妊娠中期に発現されている胎盤特異糖タンパク質PL-Imの遺伝子クローニングとアミノ酸配列を決定に成功した。本年度はバキュロウイルス-昆虫細胞を用いた糖タンパク質発現系を完成させ、糖鎖を有する遺伝子組換えPL-Im(rPL-Im)を生産した。rPL-Imはラット肝臓の受容体に結合することが示された。また、ウマ胎盤由来の絨毛性性腺刺激ホルモン(eCG)とヒト卵胞刺激ホルモン(hCG)のcDNAクローニングを行ない、バキュロウイルス-昆虫細胞系と哺乳類細胞による糖タンパク質発現系を用いて組換え糖タンパク質の生産した。現在、これらの糖タンパク質については遺伝子ポイントミューテーション法を用いて糖鎖部分の修飾分子を作成し、その生理的意義を調べている。また、胎盤は動物種を通じてガングリオシドGM3とGD3を発現していることを先に明らかにしているが、本年度は胎盤ガン由来の株化培養細胞Rcho-1もこれらのガングリオシドを発現していること、実験的にこれらの構成を変えることができることを発見した。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] K.Shiota.他: "Structural and funotional aspects of placental lactogens(PLs) and ovarian 20α-hydroxysteroid dehydrogeuase(20α-HSD)in the rat." Endocrine J.,. 41(Supl.). S43-S56 (1994)
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[Publications] M.Hirosawa 他: "A cDNA coding a new member of rat placental lactogen,PL-I mosaic(PL-Im)." Endocrine J.,. 41. 387-397 (1994)
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[Publications] K.S.Min 他: "Nucleotide sequence of eCG α-subunit cDNA and its expression in the equine placenta." J.Reprod.Dev.,. 40(in press). (1994)
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[Publications] S.Itonori 他: "Glycolipid composition of rat placenta:changes in glycosphingolipids associated with pregnancy stage." Biochem.J.,. 307(in press). (1994)
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[Publications] B.Schmitz 他: "Determination of structural elements of the LZ/HNK-1 corbohydrate epitope required for its function." Glycoconjugate J.,. 11. 345-352 (1994)
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[Publications] T.M.Slaghek 他: "Synthesis of hyaluronic acid-related di-,tri-,and tetra-saccharides having an N-acetylgluco samine residue at the reducing end." Carbohydr.Res.,. 225. 61-85 (1994)
