1993 Fiscal Year Annual Research Report
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04210106
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
森 敏 東京大学, 農学部, 助教授 (90011915)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高城 成一 岩手大学, 農学部, 名誉教授 (60005999)
亀井 茂 岩手大学, 農学部, 助手 (10194987)
伏谷 眞二 東北大学, 薬学部, 助手 (80108563)
西澤 直子 東京大学, 農学部, 助手 (70156066)
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| Keywords | Ids3 / ニコチアナミン合成酵素 / ニコチアナミンアミノ基転移酵素 / ムギネ酸 |
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| Research Abstract |
ムギネ酸生合成に関わる遺伝子をクローニングするために,以下の三方面から研究を進めてきた.(1)ニコチアナミン合成酵素(NAS)とニコチアナミンアミノ基転移酵素(NAAT)を種々のカラム操作により部分精製した.NASに関して,2D-PAGE上の酵素活性スポットを電気抽出し,N末端アミノ基を決定しようとしたがブロックされていた.プロテアーゼによる部分分解のためにはさらに大量のサンプルが必要である.一方,NAATに関しては,精製を進めるうちに,酵素がアイソザイムであることが判明した.活性画分と思われるスポットのアミノ酸配列を15残基決定したが,中に未知のアミノ酸(Trp,Cys,Met)が存在し,有効なヌクレオチドプローブ用の領域が得られていない.また,精製を進めていくうちに,このアミノ酸配列に使ったペプチドは,本命でない可能性が出てきた.そこで,部分精製画分で抗体を作製して,発現ベクターから遺伝子のクローニングを行っている.(2)鉄欠乏条件下で特異的に出現する2D-PAGE上のペプチドの部分配列を決定した.現在この遺伝子をクローニングしている.(3)鉄欠乏条件下で特異的に発現している遺伝子7個をクローニングした.そのうちの3個について,核DNAの全塩基配列を決定した.Ids3はdioxygenaseの配列を有し,コムギ-オオムギ染色体添加系列を用いたノーザンハイブリダイゼイションの結果から,ムギネ酸合成酵素である可能性が高い.
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[Publications] P.Chongp raditnun,S.Mori,and M.Chino: "Excess Copper Induces A cytosolic Cu,Zn-SOD in Soybean Roots" Plant Cell Physiol.32. 239-244 (1993)
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[Publications] T.Ohata,K.Kanazawa,S.Mihashi,NK Nishizawa,S Fushiya,S.Nozoe,M.Chino and S.Mori: "Biosynthetic Pathway of Phytosiderophores in Iron-Deficient Graminaceous Plants" Soil Sci.Plant Nutri.39. 745-749 (1993)
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[Publications] S.Nakamura,H.Hayashi,S.Mori and M.Chino: "Protein Phosphorylation in the Sieve Tubes of Rice Plants" Plant Cell Physiol.34. 927-933 (1993)
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[Publications] A.Nagatani,NK Nishizawa,S.Mori,SA Kay,NH Chua and M.Furuya: "Light Regulation of Hypocotyl Elongation and Greening in Transgenic Tobacco Seedlings That Over-Express Rice Phytochrome A" Plant Cell Physiol.34. 825-833 (1993)
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[Publications] H.Nakanishi,N Okumura,NK Nishizawa,M.Chino and S.Mori: "Expression of a gene specific for iron deficiency(Ids3)in the roots of Hordeum vulgare." Plant.Cell Physiol.34. 401-410 (1993)
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[Publications] E.Turkevitch,H.Hadir,Y.Chen,M.Chino and S.Mori: "Indirect utilization of the phytosiderophore mugineic acid as an iron souece for rhizosphere Fluorescent Pseudomonas" Bio Metals. 6. 119-123 (1993)
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[Publications] K.Singh,NK Nishizawa,M.Chino and S.Mori: "Genetic Aspect of Plant Nutrition" Kluwer Academic Publisher, 335-339 (1993)
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[Publications] S.Mori: "Biochemistry of Metal Micronutrients in the Rhizosphere" Lewis Publishers,Michigan,USA, 225-249 (1994)
