口腔疾患における線維芽細胞成長因子の唾液発現レベルに関する基礎的研究

1994 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 04557077
• Research Institution: Niigata University School of Dentistry
• Principal Investigator: 朔 敬 新潟大学, 歯学部, 教授 (40145264)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 程 くん 新潟大学, 歯学部, 助手 (40207460) ; 鈴木 誠 新潟大学, 歯学部付属病院, 講師 (50107778) ; 佐々木 一 明治乳業, 細胞工学センター, 主任 ; 中島 民雄 新潟大学, 歯学部, 教授 (10014010) ; 原 耕二 新潟大学, 歯学部, 教授 (20018419)
• Keywords: 線維芽細胞成長因子 / 唾液 / 唾液線 / ELISA / in-site ハイブリダイゼーション / ウェスタンブロット / 歯周疾患 / マイクロファージ

Research Abstract

平成4〜6年度の研究実施計画にもとづいて次の実験をおこない、ヒト唾液中に線維芽細胞成長因子が分泌されている可能性はあるものの、検出限界に達していないことが判明した。さらに唾液腺および口腔の諸疾患において、線維芽細胞成長因子の分布はその機能を推定させることをしめした。すなわち、肉芽組織の器質化過程で、とくに線維化の進行に一致して特定の細胞で発現されることが明らかになった。(1)唾液FGFレベルの検量:唾液ならびに唾液腺組織FGFの定量にはELISA法を利用したが、抗FGFポリクロナール抗体による間接法では5ng/mlの検出限界であった。モノクローナル抗体によるサンドイッチ法ELISAでは、0.1ng/mlの検出感度をえた。この検出感度で検索したかぎり、正常人唾液ではFGFを検出することはできなかった。歯周病患者唾液でも検出はできなかった。(2)組織内FGFの検出:癌および炎症組織においてFGFがどのように局在するのかを免疫組織化学的に検討した。この結果、癌組織内では、間質の血管内皮細胞、線維芽細胞、そして細胞外基質中に見いだされた。炎症組織内では、とくに細胞外基質中に顕著な局在をしめし、マクロファージ様の遊走細胞に強陽性反応があった。精査の結果、これら遊走細胞はマクロファージと肥満細胞であることを発見した。肥満細胞では細胞内顆粒に一致して局在した。ついで、in situ ハイブリダイゼーションによって各細胞の産生担当を確認した。(3)FGF定量の臨床応用:臨床検査へのFGF定量の導入は未開拓であるが、少なくとも、唾液を検査材料とすることの利点については再検討が必要であることを確認した。