1993 Fiscal Year Annual Research Report

血小板活性化因子の腎における生理学的病態生理学的意義に関する細胞生物学的検討

Research Project

Project/Area Number	04670381
Research Institution	University of Tokyo
Principal Investigator	谷口茂夫東京大学, 医学部(病), 助手 (50188380)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	中尾彰秀東京大学, 医学部(病), 助手 (10159056) 渡辺毅東京大学, 医学部(病), 助教授 (80158641) 関常司東京大学, 医学部(病), 医員 (30206619)
Keywords	血小板活性化因子 / 受容体 / mRNA / RT-PCR法 / 単クローン抗体 / 尿細管微小還流
Research Abstract	我々は先にRT-PCR法によりPAF受容体mRNAが糸球体のみならず,尿細管にも発現していることを示した.しかし,この方法は定量性を欠いていたため,生理学的,病態生理学的研究へのこの方法の応用は限られたものと考えられた.そこでまず我々は簡便でかつ信頼できる定量的なRT-PCR法の開発し,MRT-PCR法と名付けた.この方法を用い単離糸球体,尿細管でPAF受容体mRNA発現の解析を企画した.当初作成したいくつかのプライマーによる試みがうまくいかなかったが,現在,新しいプライマーによりMRT-PCR法をPAF受容体にも応用できるようになり,検討中である.同時にNorthern blot法を用い培養メサンギウム細胞におけるPAF受容体mRNA発現の調節の解析を行なった.培養メサンギウム細胞でPAF受容体mRNAはPAF自身により低下した.また,Tumor Necrosis Factor αにより低下した. PAF受容体cDNAの塩基配列より演繹されたアミノ酸配列の一部に相当するペプチドを合成し,これに対する単クローン抗体の作成を試みたが,特異的な抗体は得られなかった.本学生化学教室で作成した特異的単クローン抗体を用い,免疫組織化学の方法によりPAF受容体の腎内分布を検討した.その結果,PAF受容体は糸球体同様,尿細管にも多量に発現しており,これは先のRT-PCR法によるmRNA発現と一致した結果であった. 以上の結果より近位尿細管にPAF受容体が分布していることが示されたので,家兎の単離近位尿細管を用い微小還流の方法でPAFの細胞内クロライド濃度,およびpHに対する影響を検討したが,有意の結果は得られなかった.

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Shigeo Taniguchi et al.: "Distribution of B2-adrerergic receptor mRNA expression along the hamster nephron segments" FEBS lett.318. 65-70 (1993)
[Publications] George Seki et al.: "Effect of parathyroid hormone on acid/base Transport in rabbit renal proximal tubule S3 segment" Pftugers Arch.,European J.Physiol.423. 7-13 (1993)
[Publications] Akihide Nakao et al.: "Characterization of proseaglandin F_<2α> receptor of mouse 3T3 fibroblasts and its functional expression in Xenopus Laevis Docytes" J.Cell.Physiol.155. 257-264 (1993)
[Publications] Kazuyoshi Iida et al.: "Distribution of 1,25-dihydroxyuitamin D_3 reccptr-D_3 24-bydroxylase mRNA expression along not nephron segments" Biochem.Biophys.Res Comm.194. 650-664 (1993)
[Publications] George Seki et al.: "Evidence for conductive Cl-pathway in the basolateral membrane of rabbit proximal tubule S3 segment" J.Clin.Invest.92. 1229-1235 (1993)
[Publications] Shigeo Taniguchi et al.: "Detection and quantitation of EP_3 prostaglandin E_2 receptor mRNA along the monse nephron segments by RT-PCR" Am.J.Physiol.,Cell Physiol.(in press).
[Publications] Kiyoshi Kurokawa and Shigeo Taniguchi: "Effects of hormones on renal function in Textbook of Nephrology,3rd ed.edited by Massory & Glassak" Williams & Willkins,Baltimore(in press),

1993 Fiscal Year Annual Research Report

血小板活性化因子の腎における生理学的病態生理学的意義に関する細胞生物学的検討

Principal Investigator

谷口 茂夫 東京大学, 医学部(病), 助手 (50188380)

Research Products

[Publications] Shigeo Taniguchi et al.: "Distribution of B2-adrerergic receptor mRNA expression along the hamster nephron segments" FEBS lett.318. 65-70 (1993)

[Publications] George Seki et al.: "Effect of parathyroid hormone on acid/base Transport in rabbit renal proximal tubule S3 segment" Pftugers Arch.,European J.Physiol.423. 7-13 (1993)

[Publications] Akihide Nakao et al.: "Characterization of proseaglandin F_<2α> receptor of mouse 3T3 fibroblasts and its functional expression in Xenopus Laevis Docytes" J.Cell.Physiol.155. 257-264 (1993)

[Publications] Kazuyoshi Iida et al.: "Distribution of 1,25-dihydroxyuitamin D_3 reccptr-D_3 24-bydroxylase mRNA expression along not nephron segments" Biochem.Biophys.Res Comm.194. 650-664 (1993)

[Publications] George Seki et al.: "Evidence for conductive Cl-pathway in the basolateral membrane of rabbit proximal tubule S3 segment" J.Clin.Invest.92. 1229-1235 (1993)

[Publications] Shigeo Taniguchi et al.: "Detection and quantitation of EP_3 prostaglandin E_2 receptor mRNA along the monse nephron segments by RT-PCR" Am.J.Physiol.,Cell Physiol.(in press).

[Publications] Kiyoshi Kurokawa and Shigeo Taniguchi: "Effects of hormones on renal function in Textbook of Nephrology,3rd ed.edited by Massory & Glassak" Williams & Willkins,Baltimore(in press),

谷口茂夫東京大学, 医学部(病), 助手 (50188380)