高プロリン含有唾液ペプチドP-B前駆体cNDAのクローニング

1992 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 04671149
• Research Institution: THE NIPPON DENTAL UNIVERSITY COLLEGE AT NIIGATA
• Principal Investigator: 伊勢村 知子 日本歯科大学新潟短期大学, 教授 (10112963)
• Keywords: 唾液 / 高プロリン含有唾液ペプチド / 顎下腺cDNA / クローニング / P-B / PCR

Research Abstract

ヒト顎下腺cDNAライブラリーをスクリーニングするためのプローブとしてP-Bのアミノ酸配列に対応する36マーのオリゴスクレオチド(PB36)を合成した。この36塩基のうち塩基の特定できない12部位についてはイノシンを用いた。PB36を^<32>pで標識し、これをプローブとして2×10^5個のヒト顎下腺cDNAライブラリーをスクリーニングしたが陽性スポットは得られなかった。 次に、5´末端側に制限酵素サイトを組み込んだ2組のプライマー、PQ+CとT_<25>を合成し 顎下腺cDNAをテンプレートとしてPCR増巾を試みている。現在、増巾物のサブクローニングを行なっている段階である。以後、クローン化されたプラスミドのインサート部分の塩基配列を、解析し、増巾物がP-B前駆体に対応するみのか否かを検討する予定である。