高プロリン含有唾液ペプチドP-B前駆体cDNAのクローニング

1994 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 04671149
• Research Institution: Nippon Dental University Junior College at Niigata
• Principal Investigator: 伊勢村 知子 日本歯科大学新潟短期大学, 教授 (10112963)
• Keywords: 唾液 / 高プロリン / ヒト顎下腺 / cDNA / P-B

Research Abstract

ヒト顎下腺cDNAをテンプレート,オリゴdTを両鎖に対するプライマーとしてPCRを行なったところ数種類のcDNAが増幅されたがその中にP-BcDNAが含まれていた。P-BcDNAは約800bpで240bpの全コーディング領域を含む。シウナルペプチドは22残基で57残基のP-Bシーケンスがこれに続く。この塩基配列解析の結果から唾液中に存在する57残基のP-Bは成熟蛋白質でありより大きな蛋白質が細胞外に分泌された後分解を受けたものではないことが解る。ホモロジー検索の結果,P-B以外のヒト高プロリン蛋白質とは高い相同性を示さないので異なる遺伝子ファミリーに属すると考えられる。最も高いホモロジーを示したのはラットのVCSβmRNAである。これはアミノ酸に翻訳すると高プロリン蛋白質となりその繰り返し構造はP-Bのものと類似している。VCSβはラットの顎下腺で発現している。ヒトのDNAで最も高いホモロジーを示したのは気管ムチンであった。P-BcDNA由来フラグメントをブローブとするヒト各種組織のノーザンブロットでは胎盤に5〜8Kbのブロードなバンドが観察された。各種動物ゲノムDNAのEcoRl消化物及びヒトゲノムDNAの種々の制限酵素消化物のサザンハイブリダイゼーションの結果,複数のP-B関連遺伝子が種間を通じて存在する可能性が示唆されたのでヒトゲノムライブラリーをスクリーニングしたところ2種類のクローンが得られた。

Research Products

• [Publications] Satoko Isemura: "Molecular cloning and sequence analysis of cDNA coding for the precursor of the human salivary proline-rich peptide P-B" The Journal of Biochemistry. 115. 1101-1106 (1994)
• [Publications] 伊勢村 知子: "唾液高プロリン含有ペプチドP-B cDNAの塩基配列の解析" 生化学. 66. 788- (1994)
• [Publications] 伊勢村 知子: "唾液高プロリン含有ペプチドP-B cDNAの塩基配列の解析と関連遺伝子の探索" 歯科基礎医学雑誌. 36(補). 160- (1994)