1994 Fiscal Year Annual Research Report
ヒトサイトメガロウイルスの潜伏感染および再活性化に関する研究
Project/Area Number |
05670684
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Research Institution | Sapporo Medical University |
Principal Investigator |
沼崎 啓 札幌医科大学, 医学部, 講師 (00228272)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
若井 周治 札幌医科大学, 医学部, 助手 (30230907)
堤 裕幸 札幌医科大学, 医学部, 講師 (80217348)
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Keywords | サイトメガロウイルス / 持続感染 / 再活性化 / PCR法 / フローサイトメトリー / サイトカイン |
Research Abstract |
我々は血液細胞特に、抹消血単核球(PBMC)、リンパ球、マクロファージ系細胞におけるサイトメガロウイルス(CMV)の持続感染に注目し、CMV感染患児における血清中のサイトカイン測定の意義について検討するとともにPolumerase chain reaction(PCR)法およびフローサイトメトリー報によるCMV感染の解析も試みた。対象は尿よりCMVが分離され、CMV特異的IgM抗体の上昇が確認された周産期感染による乳児のCMV肝炎患児とした。高磁気ビーズで分画後のCMV肝炎患児のPBMCからCMVDNAの検索を行い、フローサイトメトリー法でCMV抗原陽性細胞について解析した。またフローサイトメトリーによるCMV感染患児のPBMCの一般的な表面マーカーの解析を行うとともにPCR法によるHCMVDNAmRNAの検出も試みた。PCR法におけるプライマーは前初期抗原(IE)をコードする領域に設定し、94C1分、55C2分、72C2分を1サイクルとして30サイクルで行った。血清中の抗CMVIgGIgMIgA抗体はELISA法で測定した。急性期の清中のsoluble IL-2 receptor (sIL-2R)、IL-4、TNF-α、IFN-γなどのサイトカインをELISA法を用いて測定した。PCRおよびフローサイトメトリーによる検索ではCD4,CD8陽性細胞におけるCMV感染の重要性が示唆された。またsIL-2RがCMV感染の病態に関与することも示唆された。以上の結果よりCMVの持続感染および細胞活性化の成立には多くのサイトカインの関与が推定されたが、今後はこれらの知見を基にCMV感染の成立およびその阻害因子について検討を加える予定である。
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[Publications] Numazaki K,nagata N et al: "Effect of glycyrrhizin,cyclosporin A, and tumor necrosis factor α on infection of U-937 and MRC-5 cells by human cytomegalovirus." J Leukoc Biol. 55. 24-28 (1994)
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[Publications] Numazaki K,Umetsu M et al: "Effect of glycyrrhizin in children with liver dysfunction associated with cytomegalovirus infection" Tohoku J Exp Med. 172. 147-153 (1993)
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[Publications] Numazaki K et al: "Analysis of human cytomegalovirus-infected peripheral blood mononuclear cells〜" J Leukoc Biol. 56. 187-191 (1993)
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[Publications] Numazaki K,Chiba S et al: "Diagnostic value of rapid detection of Chlamydiatrachomatis〜" Diagn Microbiol Infect Dis. 17. 233-234 (1993)
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[Publications] Numazaki K,Chiba S et al: "Evaluation of diagnostic assays for neonatal and infantile chlamydialinfections." Tohoku J Exp Med. 170. 123-129 (1993)
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[Publications] Numazaki K,Chiba S.: "Natural course and trial of treatment for infantile liver dysfunction associated with cytomegalovirus infections." In Vivo. 7. 477-780 (1993)
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[Publications] Numazaki K,Nagata N et al: "The First International Symposium of the Japan-Russia North East Asia Medical Exchange Proceedings" Japan Russia Medical Exchange Foundation, 321 (1993)