難治性てんかんモデル脳における遺伝子制御機構の解析

1993 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 05670822
• Research Institution: Osaka City University
• Principal Investigator: 山上 栄 大阪市立大学, 医学部, 教授 (20047004)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 横谷 昇 大阪市立大学, 医学部, 助手 (10244641) ; 撫井 弘二 大阪市立大学, 医学部, 助手 (20219835)
• Keywords: EIマウス / c-fos / c-Jun / プロトオンコジン / てんかん / 発作 / immunobloting / ベメクリド

Research Abstract

痙攣履歴を有するEI[s]マウスの放り上げ刺激(以下T)による発作において、脳のc-fosmRNAの発現が、EI[s]、履歴のないEI[ns]および発作非感受性のddYマウスの腹腔内にベメグリド(以下B)を注射し、発作を誘発した場合に比べて延長していることをわれわれは既に報告した。今回は、同じ翻訳産物のFosとJun蛋白質について検討した。EI[s]、EI[ns]およびddY群の脳から2.2M-庶糖溶液を用いて核を調製し、その抽出液をSDS-PAGEで分析した。ゲルをPVDF膜に転移し、FosまたはJun抗体と[^<125>]-ProteinAとを用いてimmunoblotingを行った。反応後に出現したバンドはオートラジオグラフィーによって検出した。Fosの分子両は62kDであった。EI群にTを加え、発作を誘発した場合には、30分後よりFosが発現し、2時間後には最大となったが、その後減少し、48時間後には消失した。EI[s]群にBを注射し、発作を誘発すると、60分後にFosが発現し、24時間後に消失した。EI[ns]とddY群にBを注射すると、30分後よりFosの発現が起こり、EI[ns]では4時間後、ddYでは60分後にFosの発現が消失した。他方、Junの分子量は39kDであった。Tによって誘発されるJunの発現はBによる場合よりも短時間であった。このことは、EIマウスにおいてTにより発作を惹き起すと、FosとJunとの複合体である転写制御因子のAP-1 complexが形成され、プロエンケファリンやその他の標的遺伝子を活性化する可能性を示唆している。その結果、EIマウス脳における異常可塑性が生じ、発作感受性が亢進すると推測される。

Research Products

• [Publications] Eiichi Katsumoto,Sakae Yamagami et al.: "THE REGULATION OF c-fos mRNA EXPRESSION IN EI MOUSE BRAIN AFTER SEIZURES" NEUROSCIENCES. 18. 21-25 (1992)
• [Publications] Koji Mui,Sakae Yamagami et al.: "THE RELATION SHIP BETWEEN TRANSLATIONAL ACTIVITY AND POLY(A)TRACT OF mRNA UPON EI MOUSE BRAIN" NEUROSCIENCES. 18. 35-42 (1992)
• [Publications] 勝元栄一・山上栄ら: "発作感受性のEIマウス発作後におけるc-fosmRNA発現の誘導について" てんかん研究. 11. 1-8 (1993)
• [Publications] 勝元栄一・山上栄ら: "EIマウス脳におけるFosと異常可塑性の関連性について" 神経化学. 32. 66-67 (1993)
• [Publications] 黒田陽子・山上栄ら: "EIマウス発作とPTZ注射による痙攣発作の脳蛋白質合成に及ぼす影響" 神経化学. 32. 332-333 (1993)
• [Publications] 片山雅文・山上栄ら: "EIマウスの痛覚鈍麻-発作の影響とオピオイド系の関与" 神経化学. 32. 452-453 (1993)