1994 Fiscal Year Annual Research Report
ミトコンドリアベクターによる脳腫瘍細胞への外来遺伝子の導入と遺伝子治療
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05807126
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| Research Institution | SAGA MEDICAL SCHOOL |
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Principal Investigator |
木原 俊一 佐賀医科大学, 医学部, 助手 (30253610)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
白石 哲也 佐賀医科大学, 医学部, 助手 (70206275)
田渕 和雄 佐賀医科大学, 医学部, 教授 (50116480)
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| Keywords | グリオーマ / ミトコンドリア / Bcl-2 |
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| Research Abstract |
1)昨年度はミトコンドリアをロ-ダミン123染色にて確認してきた。しかしこの物質はミトコンドリアと物理的に結合するため、障害されたミトコンドリアでは結合が弱くなり、その結果ミトコンドリア数が低く見積もられる欠点があった。このため我々はミトコンドリアの外膜に存在する特異的な蛋白質であるBcl-2に注目して検討した。抗Bcl-2抗体を一次抗体とする蛍光免疫染色像を共焦点レーザー顕微鏡にて観察した。その結果Bcl-2はミトコンドリアのみならず核膜にも存在することが明らかとなった。またエチジウムブロマイド処理により染色されるミトコンドリアが減少した。
2)T98Gヒトグリオーマ細胞よりミトコンドリアを分離し、これをエチジウムブロマイド処理によりミトコンドリアが減少したT98Gの培養液中に混和した。その結果ロ-ダミン123の蛍光強度の増加とBcl-2染色強度の増加が認められた。このことより分離されたミトコンドリアが細胞内に移行することが明らかとなった。しかしT98G由来のミトコンドリアをU251およびA173細胞に処理しても染色強度は増加しなかった。
3)クロラムフェニコール耐性CAP23の入手が困難であり、ミトコンドリア移入によるグリオーマ細胞の形質転換実験は行うことができなかった。
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Research Products
(1 results)
