1995 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
06454519
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Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
Principal Investigator |
大井田 新一郎 東京医科歯科大学, 歯学部, 助手 (10114745)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
寺島 達夫 東京医科歯科大学, 歯学部, 助教授 (20114770)
一條 秀憲 東京医科歯科大学, 歯学部, 助手 (00242206)
朝比奈 泉 東京医科歯科大学, 歯学部, 助手 (30221039)
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Keywords | 骨形成タンパク質 / レセプター / ホメオボックス / リコンビナント / バキュロウィルス / アルカリホスファターゼ |
Research Abstract |
骨形成タンパク質(BMP)はTGF-βスーパーファミリーに属している。このスーパーファミリーに属するタンパク質は既に20種類近くが報告されており、そのほとんどは細胞の増殖分化に関与している。これらの分化増殖因の基本的な立体構造が類似していることから、これらのレセプターもファミリーを形成していることが予想された。そのため、すでにクローニングされていたTGF-β及びアクチビンにたいするレセプターの構造からホモロジーの高い部位のプライマーを作製し、PCRで何種類かの遺伝子をクローニングした。さらにcDNAライブラリーより全長をクローニングし、発現ベクターにつなぎ、細胞に組み込み、BMPで細胞内シグナル伝達系が起動されるクローンを選択した。シグナル伝達が起動したかどうかは細胞増殖抑制とプラスミノーゲンアクチベータ-インヒビター1(PAI-1)の指導で決定した。これらのシグナル伝達はTGF-βスーパーファミリーには共通にみられる伝達経路である。我々はさらにBMPにより細胞が骨芽細胞に分化誘導される時に用いられる特異的シグナル伝達経路を解析する系を確立し、骨芽細胞の分化マーカーであるオステオカルシンの遺伝子発現調節領域におけるBMP応答部位を検索中である。 動物への移植実験ではBMPにより異所性に骨組織が形成されるとき、クラスタータイプのホメオボックス遺伝子とMsx1,2のホメオボックス遺伝子が発現することを既に報告した。その後、さまざまな場所に移植して、これらの遺伝子発現を調べた。その結果、Msx1,2の発現はどの部位でも認められたが、クラスタータイプは移植する場所により異なったタイプを示すことが示唆され、頭部顔面領域への移植では、骨組織は形成おこるが、クラスタータイプのホメオボックス遺伝子の発現はなかった。Msx1,2の骨形成との関わりをさらに追求中である。
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[Publications] T.Iimura,S.Oida 他: "Molecular cloning and sequence of bovine Msx-1 homeobox-containing gene cDNA from bovine odontoblast library" DNA Sequence. 5. 233-237 (1995)
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[Publications] M.Goseki,S.Oida 他: "Identification of bone-type alkaline phosphatase mRNA from human periodontal ligament cells" J.Dent.Res.74. 319-322 (1995)
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[Publications] S.Oida,T.Iimura 他: "Cloning and sequence of bone morphogenetic protein 4(BMP-4)from a human placental cDNA library" DNA sequence. 5. 273-275 (1995)
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[Publications] Y.Maruoka,S.Oida 他: "Production of functional human bone morphogenetic protein-2 using a baculovirus/Sf-9 insect cell system" Biochem.Mol.Biol.Int.35. 957-963 (1995)
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[Publications] M.Goseki,S.Oida 他: "Voluntary exercise increases osteogenetic activity in rat bones" Bull.Tokyo Med.Dent.Univ.42. 1-8 (1995)
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[Publications] S.Kasugai,S.Oida 他: "Expression of prostaglandin E receptor subtypes in bone:Expression of EP_2 in bone development" Bone. 17. 1-4 (1995)
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[Publications] 大井田新一郎(分担): "骨形成と骨吸収及びそれらの調節因子(BMP)" 編集 須田立雄,発行者 廣川節男,廣川書店, 494(12) (1995)
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[Publications] 飯村忠浩・大井田新一郎: "骨粗鬆症(類骨,ハイドロキシアパタイトと石灰化,骨基質タンパク質)" 編集 松本俊夫,中村利孝,発行人 葛西文明 羊土社, 182(4) (1995)