1994 Fiscal Year Annual Research Report
CMLの自家骨髄移植:熱処理によるPh陽性細胞のアポトーシス増強とその選択的除去
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06557062
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Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research (B)
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| Research Institution | Niigata University |
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Principal Investigator |
森山 美昭 新潟大学, 医学部付属病院, 助教授 (00018706)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
岸 賢治 新潟大学, 医学部付属病院, 助手 (30186209)
高橋 益広 新潟大学, 医学部, 助手 (90179531)
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| Keywords | 慢性骨髄性白血病 / 温熱法 / 自家骨髄移植 / 腫瘍細胞の主体外除去 / 熱ショック蛋白 / アポトーシス |
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| Research Abstract |
慢性骨髄性白血病(CML)の自家骨髄移植(PBSCT含む)を実現するためには、Ph陽性細胞のex vivo purgingが必須の条件である。変異性や発癌性もないといわれる温熱処理をex vivo purgingに導入(Blood 67:802,1986.)し、既に急性白血病(AML,ALL等)の自家骨髄移植に臨床応用(BMT7:163,1991.)してきたが、Phクローンは熱にやや抵抗性で、熱処理単独では2-3 log程度のpurging効果であり、Phクローンの完全除去(5-6 log)には不十分であることが分かった。そこで、温熱によるPh陽性細胞の殺細胞効果(アポトーシス)をより増強する目的で、AZTや造血のnegative regulator(IFN,TNF等)、さらに熱ショック蛋白誘導阻害剤(Quercetin)などの併用を試みたところ、細胞形態およびDNA fragmentationから、Quercetinが最も強力な熱処理によるアポトーシス誘導剤であり、BCR/ABL遺伝子導入細胞のみならず、CML患者の骨髄細胞(末梢血)で確認した。即ち、熱ショック蛋白誘導阻害剤であるQuercetin(5-20μM)の添加で,Phクローン(CML-CFU)を5-7 log除去することが可能である。更に、Quercetinの添加で、細胞形態やDNA framentationのみならず、Fas抗原の発現が著しく増強され、熱ショック蛋白誘導阻害剤は熱による細胞死(アポトーシス)を誘導することが確認された。その結果、温熱+Quercetin処理でPhクローン(CML-CFU)を4-6 log程度除去することが可能となり、この点、CMLの自家骨髄移植(PBSCTを含む)の実用化が一歩前進した。
一方、Quercetinの添加で、ヒト造血幹細胞(CFU-GM)の細胞死も1 log程度増強され、その阻止の目的で、熱ショック蛋白誘導剤(アポトーシス阻止)であるインターフェロン(IFN)(BMT8:301,1991.)の先行添加など検討中である。
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[Publications] Y.Osman,Y.Moriyama: "Enhanced elimination of Ph^T chromosome cells in vitro by combined hyperthermia and other drugs:" Exp Hematol. (in press). (1995)
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[Publications] M.Masuhiro,et al.: "Transfection of the bcr/abl oncogene into factor-dependent cells by electroporation" Hematol Oncol. 12. 53-60 (1994)
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[Publications] Y.Moriyama,et al.: "Prediction of the ability to purge clonogeric B-cell lymphoma from hurman bone marrow in vitro by heat:" Bone Marrow Transplant. 11. 437-441 (1993)
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[Publications] Y.Moriyama,et al.: "Effect of GM-CSF on chemotherapy induced granuloiytopenia in patients with malignancies." AcTa Haematol. 89. 70-75 (1993)
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[Publications] Y.Moriyama,et al.: "A simple elimination of clonoglnic Tumor cells from human bone marrow by heat:" Ann Hematol. 64. 266-269 (1992)
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[Publications] Y.Moriyama,et al.: "In vitro purging of clonogenic leukimic cells from human bone manow by heat : simulation experiments" Leuk Res. 16. 973-976 (1992)
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[Publications] 森山美昭(分担): "血液病学(第2版)" 文光堂, 1813 (1994)
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[Publications] 森山美昭(分担): "深在性真菌症の最新治療計画" メディカル:ジャーナル社, 230 (1993)
