着床におけるマクロファージの機能制御に関する分子細胞生物学的研究

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07044182
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 舘 鄰 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (30011711)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): MOSHE Shani イスラエル国, ボルカニ農業研究センター, 教授 ; NAVA Dekel イスラエル国, ワイツマン科学研究所, 準教授 ; RACHEL Goldm イスラエル国, ワイツマン科学研究所, 講師 ; UREIL Zor イスラエル国, ワイツマン科学研究所, 教授 ; AHUVA Knyszi イスラエル国, ワイツマン科学研究所, 助手 ; 山内 啓太郎 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助手 (70272440) ; 東條 英昭 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助教授 (20041668) ; 高橋 迪雄 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (30011943) ; 林 良博 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (90092303)
• Keywords: マクロファージ / トロフォブラスト / 胎盤 / シバヤギ / 子宮上皮細胞 / トランスジェニック

Research Abstract

本研究の主たる目的は、イスラエル側のマクロファージの分子・細胞生物学的研究に関する知識技術やトランスジェニック作出に関する知識・技術の提供を受けると同時に、我が国側で、東大牧場でクローズドコロニーとして維持されているシバヤギを材料として、子宮上皮細胞、トロフォブラスト細胞、ならびに、マクロファージの培養系を確率し、胚移植後の着床効率を高めるための基礎知識を得ることにある。Ashuva Knyszynski博士の来日を仰ぎ、シバヤギの培養細胞系確率を試みた。子宮上皮細胞系については、培養細胞下部を確立することができた。現在、クローン化の実験を進めている。一方、トロフォブラスト細胞については、予備的にトロフォブラスト細胞と判定された細胞について、培養系の確率を図り、明らかに繊維芽細胞とは挙動の異なる培養細胞系を得た。なお、イスラエル側に送って実験する計画であったが、得られたマクロファージの適当な採取・培養法の確率ができぬ段階で、研究が終了することとなった。なおイスラエル側では、マクロファージの活性化におけるシグナルトランスダクションについて研究を進め、主として、ラットおよびマウスのマクロファージを用いて実験を行ない、MAPキナーゼの関与について興味深い知見が得られつつある。一方、われわれの研究室では、マウスならびにシバヤギを用いて、胎盤に置けるホメオボックス遺伝子群の発現動態の解析、マトリックスメタロプロテアーゼcDNAに関する研究を行ない、興味深い知見を得ることができた。さらに、マウスを用いた卵成熟の研究で著名な、Nava Dekel博士に来日を依頼し、家畜における胚操作の一環として重要な、invitro卵成熟におけるシグナルトランスダクション系の役割に関する最新の研究成果や技術の情報を得ると共に、Weizmann研究所で所有するMRI装置によるラット着床部位や時期の非破壊的検出と、その着床・胎盤形成研究における応用について、今後の共同研究の可能性を論議した。また、イスラエルでトランスジェニックヤギ作出に成功しているMoshe Shani博士には、実際のトランスジェニックヤギ作出の作業を見学させてもらうことができた。また、博士に来日を依頼して、最新の研究情報を取得するとともに、今後の相互の研究交流の端緒を開くことができた。今回の共同研究は、東大牧場のシバヤギの繁殖率の低下、Weizmann研究所における研究体制の大幅な改組など、不足の事態が生じ、当初予定sた研究計画を消化することが困難であったが、今回の研究を端緒としても、現在も、両サイドで研究を研究を継続しており、今後、さらに、重要な成果が、日本、イスラエルの双方で挙げられることが期待される。

Research Products

• [Publications] Tanaka SS: "Cell-cell contact down-regulates expression of membrane type metalloproteinase-1 (MT1-MMP) in a mouse mammary gland epithelial cell line." Zoological Science. 14. 95-99 (1997)
• [Publications] Goldman R: "Activation of macrophage PtdIns-PLC by phorbor ester and vanadate : involvement of reactive oxygen species and tyrosine phosphorylation." Biochemical Biophysical Research Communication. 199. 334-338 (1994)
• [Publications] Suenaga A: "Quanititative analysis of the spreading of the mouse trophoblast in vitro : a model for early invasion." Placenta. 17. 583-590 (1996)
• [Publications] Hase W: "Transgenic mice overexpressing foreign whey acidic protein (WAP) genes driven by metallothionein promoter." Journal of Reproduction and Development. 42. 265-271 (1996)
• [Publications] Dekel N: "Protein phosphorylation/dephosphorylation in the meiotic cell cycle of mammalian oocytes." Reviews of Reproduction. 1. 82-88 (1996)
• [Publications] Barash I: "Co-integration of β-lactoglobulin/human serum albumin hybrid genes with the entire β-lactoglobulin gene or the matrix attachment region element : repression of human serum albumin and β-lactoglobulin expression in the mammary gland and dual regulation of the transgenes." Molecular Reproduction and Development. 45. 421-430 (1996)
• [Publications] Barash I: "Elements within the β-lactoglubulin gene inhibit expression of human serum albumin cDNA and minigenes in transfected cells but rescue their expression in the mammary gland of transgenic mice." Nucleic Acid Research. 24. 602-610 (1996)
• [Publications] Ilan M: "β-lactoglubulin/human serum albumin fusion genes do not respond accurately to signals from extracellular matrix in mammary epithelial cells from transgenic mice." Experimental Cell Research. 228. 146-159 (1996)
• [Publications] Ilan M: "Dual regulation of β-lactoglubulin/human serum albumin gene expression by the extracellular matrix in mammary cells from transgenic mice." Experimental Cell Research. 224. 28-38 (1996)
• [Publications] Hara T: "Expression of matrix metalloproteinase-11 (stromelysin-3) and TIMP-1 genes in the placenta and the uterus during estrous cycles and gestation in the mouse." Journal of Reproduction and Development. 41. 278-292 (1995)
• [Publications] Kawamata Y: "Quantitative analysis of the expression of whey acidic protein (WAP) mRNA in the prolactin- responsive mouse mammary gland epithelial cell line,Hc11." Journal of Reproduction and Development. 41. 331-338 (1995)
• [Publications] Yoshida S: "Molecular cloning of cDNA for equine ovarian inhibin/activin βA-subunit." Journal of Veterinary Medical Science. 57. 469-473 (1995)
• [Publications] Granot I: "The gating mechanism of gap junctions in rat ovarian follicles." Progress in Cell Research. 4. 443-445 (1995)
• [Publications] Goldman R: "On the mechanism of activation of PLA2 and PtdTns-PLC by fluoride in murine macrophages." Advances in Prostaglandin,Thromboxane and Leukotriene Research. 23. 93-97 (1995)
• [Publications] Goldman R: "A pleiotropic effect of fluoride on signal transduction in macrophages : is it mediated by GTP binding proteins?" Journal of Basic & Clinical Physiology and Pharmacology. 6. 79-94 (1995)
• [Publications] Matsuyama S: "Immunoreactive (ir)-transforming growth factor (TGF)-β in rat corpus luteum : ir-TGF)-β is expressed by luteal macrophages." Endocrine Journal. 42. 203-217 (1995)