1996 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
07406009
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Research Institution | The University of Tokyo |
Principal Investigator |
会田 勝美 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (50012034)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
河野 迪子 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助手 (70092202)
小林 牧人 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助教授 (30183809)
鈴木 譲 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助教授 (40107412)
渡辺 俊樹 東京大学, 海洋研究所, 助教授 (00272526)
長澤 寛道 東京大学, 海洋研究所, 教授 (60134508)
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Keywords | 甲殻類 / クルマエビ / ペプチドホルモン / CHH / MIH / 脱皮 / cDNAクローニング |
Research Abstract |
クルマエビの眼柄から昨年度は6種のCHH族ペプチド(Pej-GP-I,II,III,IV,V,VI)を単離し構造を決定した.今年度は新たに強い血糖上昇活性を有するPej-SGP-VIIを単離し構造を決定した.これらのCHH族ペプチドのアミノ酸配列を基にしてプライマーを作製し,PCRを行いcDNA断片を増幅した.それらをプローブとして眼柄cDNAライブラリーのスクリーニングを行い,Pej-SGP-I,III,IV,V,VIIをコードするcDNAを単離し塩基配列を決定した.Pej-SGP-I,III,V,VIIはシグナルペプチド,CPRP,プロセシングシグナル,ホルモン部分,アミド化シグナルより構成されており,Pej-SGP-IVはシグナルペプチドとホルモン部分のみから構成されていることが判明した.また血糖上昇活性を有するPej-SGP-III(CHH)と脱皮抑制作用を有するPej-SGP-IV(MIH)のC末端ペプチドを化学合成した後,ウサギに注射し抗体を作製した.得られた特異抗体を用いてX器官の免疫組織化学を行ったところ,CHH細胞,MIH細胞及び両者を産生する細胞が存在することが判明した.成熟雄の脱皮周期におけるこれらの細胞の動態を調べたところ,脱皮期間においてやや染色性が低下するものの細胞数は変化しないことが分かった.さらに成熟卵巣から卵黄蛋白質を単離し,抗体を作製した.これらの抗体を用いて血リンパ中のビテロジェニンの測定系を作製するとともに,卵巣の免疫組織化学的染色を行った.また,キチナーゼをコードする3つのcDNAクローンを得ることが出来た.これらのcDNAの解析からクルマエビの肝膵臓には複数のキチナーゼが存在すること,肝膵臓と表皮とは異なったキチナーゼを発現すること,が示唆された.
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Watanabe,Kono,Aida & Nagasawa: "Isolation of a cDNA encoding a putative chitinase precursor in the kuruma prawn Penaeus japoniecu" Mol.Mar.Biol.Biotechnol.5. 299-303 (1996)
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[Publications] Yang,Aida,Terauchi Sonobe & Nagasawa: "Amino acid sequence of a peptide with molt-inhibiting activity from the Kuma prawn Penaeus japonicus" Peptides. 17. 197-202 (1996)
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[Publications] Nagasawa,Yang,Shimizu Aida,Terauchi & sonobe: "Isolation and amino acid sequence of a molt inhibiting hormone from the American crayfish,Procambas clarkii" Biosci.Biotech.Biochem.60. 554-556 (1996)
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[Publications] Terauchi,Tsutsui,Yang Aida,& Nagasawa: "Identification of a molt-inhibiting hormone from the sinus gland of the crayfish,Procambarus clarKii" Zool.Sci.13. 295-298 (1996)
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[Publications] Ohira,Watanabe,Nagasawa Aida: "Cloning and sequence analysis of a cDNA encoding a crustacean hyper glycemic hormone from the Kuruma prawn" Mol.Mar.Biol.Biotechnol.(印刷中).
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[Publications] Yang,Aida,Nagasawa: "Amino acid sequences and activities of multiple hyperglycemic hormones from the Kuruma prawn" Peptide. (印刷中).