1996 Fiscal Year Annual Research Report

緑膿菌の抗生物質排出ポンプの遺伝子発現と蛋白質解析

Research Project

Project/Area Number	07457073
Research Institution	Tokai University School of Medicine
Principal Investigator	中江太治東海大学, 医学部, 教授 (50102851)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	米山裕東海大学, 医学部, 講師 (10220774)
Keywords	抗生物質 / 薬剤耐性 / 排出 / 緑膿菌 / 排出ポンプ / 細胞膜 / 多剤耐性 / 膜蛋白質
Research Abstract	緑膿菌は多くの抗生物質に耐性を示す。その理由の一つはこの菌は薬剤を能動的に細胞外に排出することにある。そしてそれに係わる排出蛋白としてMex-オペロンにコードされる内膜蛋白2種と外膜蛋白一種が同定されている。そこで本研究ではこれらの蛋白質の役割を明らかとするため、次のような実験を行った。(i)薬剤排出に際して薬剤を認識する蛋白を特定化するため光感応性fluoroquinolone及びテトラサイクリンを用いた標識の実験を行ったところ、分子量約13,000と24,000の蛋白質が標識されたが、それらはMex-蛋白とは異なっていた。(ii)MexA,MexB及びOprMに対する抗体を作成するためこれらをコードする遺伝子にpolyhistidine標識を遺伝子操作で付けアフィニティクロマトによって各々の蛋白質を精製した。これを用いて抗体を作成し、次に述べる実験に供した。(iii)Mex-オペロンのmexA,mexB,oprMを独立に破壊した菌を作成し、これを用いてciprofloxacinの細胞内蓄積の実験を行った。その結果mexA,とmexBの変異株では野性株より多くのシプロフロキサンシンが蓄積した。更にoprM欠損株ではmexA/B欠損株より更に高いレベルの蓄積が認められた。従ってこれらの蛋白質の薬剤排出における役割が明らかとなりかけてきた。

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Yoshihara,E.,Gotoh,N.,Nishino,T.,Nakae,T.: "Protein D2 porin of Psudomonas aeruginosa outer membrane bears the protease activity." FEBS Letters. 394. 179-182 (1996)
[Publications] Nakae,T.,Yoshihara,E.: "Protein D2,a multifuncaitonal channel-forming outer membrane protein of Pseudomonas aeruginosa." Molelcular Biology of Pseudomonads. 363-37C (1996)
[Publications] Nakae.T.: "Characterization of novel hemagglutinin of diarrhea-associated Escherichia coli tha has characateristics of diffusely adhering E.coli and Enteroaggregative E.coli." Infect.Immun.64. 3694-3702 (1996)
[Publications] Ikigai.H..Akatuka.A..Tsuiivama.H..Nakae.T.: "Mechanism of membrane damage by EITor hemolysin of Vibrio cholerae O1." Infect.Immunity. 64. 2968-2973 (1996)
[Publications] Yoneyama,H.and Nakae.T.: "Protein C of the outer membarane of Pseudomonas aeruginosa is the copper regulated channel protein." Microbiology. 142. 2137-2144 (1996)
[Publications] 中江太治: "緑膿菌における薬剤排出ポンプと耐性--多種類の抗生物質を効率よく排出するしくみは?" 化学と生物. 34. 353-355 (1996)
[Publications] 中江太治: "標準微生物学" 医学書院, 15 (1996)

1996 Fiscal Year Annual Research Report

緑膿菌の抗生物質排出ポンプの遺伝子発現と蛋白質解析

Principal Investigator

中江 太治 東海大学, 医学部, 教授 (50102851)

Research Products

[Publications] Yoshihara,E.,Gotoh,N.,Nishino,T.,Nakae,T.: "Protein D2 porin of Psudomonas aeruginosa outer membrane bears the protease activity." FEBS Letters. 394. 179-182 (1996)

[Publications] Nakae,T.,Yoshihara,E.: "Protein D2,a multifuncaitonal channel-forming outer membrane protein of Pseudomonas aeruginosa." Molelcular Biology of Pseudomonads. 363-37C (1996)

[Publications] Nakae.T.: "Characterization of novel hemagglutinin of diarrhea-associated Escherichia coli tha has characateristics of diffusely adhering E.coli and Enteroaggregative E.coli." Infect.Immun.64. 3694-3702 (1996)

[Publications] Ikigai.H..Akatuka.A..Tsuiivama.H..Nakae.T.: "Mechanism of membrane damage by EITor hemolysin of Vibrio cholerae O1." Infect.Immunity. 64. 2968-2973 (1996)

[Publications] Yoneyama,H.and Nakae.T.: "Protein C of the outer membarane of Pseudomonas aeruginosa is the copper regulated channel protein." Microbiology. 142. 2137-2144 (1996)

[Publications] 中江太治: "緑膿菌における薬剤排出ポンプと耐性--多種類の抗生物質を効率よく排出するしくみは?" 化学と生物. 34. 353-355 (1996)

[Publications] 中江太治: "標準微生物学" 医学書院, 15 (1996)

中江太治東海大学, 医学部, 教授 (50102851)