1997 Fiscal Year Annual Research Report

骨軟部悪性腫瘍の特異的染色体転座による再配列遺伝子発現の分子機構解析

Research Project

Project/Area Number	07457324
Research Institution	HOKKAIDO NUIVERSITY
Principal Investigator	阿部周一北海道大学, 理学部, 助教授 (80125278)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	野島孝之金沢医学大学, 病理部, 教授 (50142732) 吉田廸弘北海道大学, 理学部, 教授 (60001765)
Keywords	骨軟部悪性腫瘍 / 特異的染色体転座 / 遺伝子再配列 / RT-PCR / キメラ遺伝子cDNA / アンチセンスDNA
Research Abstract	特異的染色体転座を保持した症例を含むユ-イング肉腫、滑膜肉腫、横紋筋肉腫などの骨軟部悪性腫瘍において研究を進め、今年度は以下の結果を得た。 1.ユ-イング肉腫t(11;22)転座によるEWS-FLI1キメラmRNAのRT-PCRを用いた発現解析から、通常サイズの産物を含む複数の転写産物が調べた13例中4例に認められた。cDNA構造解析から、変異転写産物はエクソン9の欠落を含むEWS遺伝子mRNAのスプライシング異常によることが分かった。サイズの大きなcDNA産物ではイントロンの挿入やエクソンの重複などが示唆された。エクソンの欠落がある変異産物は、融合により読み枠がずれてFLI1遺伝子側に終止コドンができており、C末端のDNA結合ドメインを欠く非機能的タンパクに翻訳されるものと推測された。 2.軟部悪性黒色腫t(12;22)転座によるEWS-ATF-1キメラcDNAの構造解析から、調べた3例中1例で、EWSエクソン8の欠失の外、従来の報告には無いATF-1エクソン9の欠失が認められた。これらの変化は、キメラタンパクのDNA結合ドメインなどの外にあるためキメラタンパクの機能には影響しないと考えられた。 3.キメラ遺伝子の複数転写産物は、滑膜肉腫t(X;18)転座によるSYT-SSXにおいても認められ、興味深いことに調べた9例全てに生じていることが分かった。得られた3種類のキメラ転写産物のうちサイズの大きい2つは、SYTへの塩基の挿入によることが分かった。 4.SYT-SSXキメラcDNA結合部位を含む複数のアンチセンスオリゴDNAを作製し、t(X;18)転座保有培養株2例に処理したところ、0.5〜10μMの範囲で濃度依存的に細胞増殖ならびにキメラmRNA発現の抑制が認められた。この結果は、SYT-SSXキメラ遺伝子が滑膜肉腫の発生に直接関与することを強く示唆している。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Keiko Obatga: "Molecular characterization of at(11;22)(q24;q12)translocation junction in two cases of Ewing's sarcoma" Chromosome Science. (印刷中).
[Publications] Hiroaki Hiraga: "Establishment of a new continuous clear cell sarcoma cell line:Morphological and cytogenetic characterization and detection of chimeric EWS/ATF-1 transcripts" Virchows Aechiv A,Pathological Anatomy & Histopathology. 431・1. 45-51 (1997)
[Publications] Kenta Sumiyama: "Human class III POU genes,POU3F1 and POU3F3,map to chromosomes 1p34.1 and 3p4.2" Mammalian Genome. 9・2. 180-181 (1997)
[Publications] Manabu Musashi: "Spontaneous remission in a patient with chronic myelogenous leukemia" New England Journal of Medicine. 336・5. 337-339 (1997)
[Publications] 野島孝之: "分子生物学手法を用いた骨軟部腫瘍の組織診断" 臨床病理. 45・7. 661-666 (1997)
[Publications] 平賀博明: "悪性骨軟部腫瘍の遺伝子異常" 骨・関節・靭帯. 10・6. 675-682 (1997)

1997 Fiscal Year Annual Research Report

骨軟部悪性腫瘍の特異的染色体転座による再配列遺伝子発現の分子機構解析

Principal Investigator

阿部 周一 北海道大学, 理学部, 助教授 (80125278)

Research Products

[Publications] Keiko Obatga: "Molecular characterization of at(11;22)(q24;q12)translocation junction in two cases of Ewing's sarcoma" Chromosome Science. (印刷中).

[Publications] Hiroaki Hiraga: "Establishment of a new continuous clear cell sarcoma cell line:Morphological and cytogenetic characterization and detection of chimeric EWS/ATF-1 transcripts" Virchows Aechiv A,Pathological Anatomy & Histopathology. 431・1. 45-51 (1997)

[Publications] Kenta Sumiyama: "Human class III POU genes,POU3F1 and POU3F3,map to chromosomes 1p34.1 and 3p4.2" Mammalian Genome. 9・2. 180-181 (1997)

[Publications] Manabu Musashi: "Spontaneous remission in a patient with chronic myelogenous leukemia" New England Journal of Medicine. 336・5. 337-339 (1997)

[Publications] 野島孝之: "分子生物学手法を用いた骨軟部腫瘍の組織診断" 臨床病理. 45・7. 661-666 (1997)

[Publications] 平賀博明: "悪性骨軟部腫瘍の遺伝子異常" 骨・関節・靭帯. 10・6. 675-682 (1997)

阿部周一北海道大学, 理学部, 助教授 (80125278)