1996 Fiscal Year Annual Research Report

高機能サイレ-ジ乳酸菌の機能増強と実用化に関する研究

Research Project

Project/Area Number	07556094
Section	試験
Research Institution	Kyushu University
Principal Investigator	緒方靖哉九州大学, 農学部, 教授 (20038277)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	田中治農林水産省草地試験場, 研究員大桃定洋農林水産省畜産試験場, 研究員土居克実九州大学, 農学部, 教務員 (40253520) 増田泰之九州大学, 農学部, 教授 (60038263) 藤尾雄策九州大学, 農学部, 教授 (90038224)
Keywords	サイレ-ジ / 高機能性乳酸菌 / 乳酸菌生剤 / クローニング / ファージ耐性 / 育種 / 組換え体 / 実用化
Research Abstract	西南暖地型気候に適応したサイレ-ジ乳酸菌の機能開発を目的とし、高温適応性、高乳酸発酵性、耐乳酸性を示す80株のNGRI株を分離し、さらにこれらの菌株の高機能化と実用化をめざした。本年度は、(1)分離した菌株の簡便な同定法の開発、(2)サイレ-ジ発酵中のファージ汚染防止法の開発、(3)乳酸生成経路に関与する遺伝子のクローニング、機能解析及び改良遺伝子の利用開発、(4)サイレ-ジ中の過剰硝酸の対策として、硝酸分解酵素遺伝子の利用開発についての成果を報告する。 (1)サイレ-ジから分離した形態、ゲノムサイズ、DNA相同性等の性質の異なる10種のファージを用いたファージタイピングを試みた。分離菌株、乳酸桿菌タイプ種9株及び市販サイレ-ジスターター5種について宿主域を検討した結果、菌種・菌株間にファージ感受性に差異が認められ、ファージタイピングが可能であると判断した。 (2)プラスミドのファージ耐性遺伝子の利用開発を目指し、ファージ耐性遺伝子を有するプラスミドpLKSのの全塩基配列を決定した。pLKSの全塩基数は2051bpであり、3個のORFからなっていた。918bpからなるORFはアミノ酸配列レベルでLactobacillus acidophilusのプラスミドpLA105等のRepと高い相同性が認められ、本ORF産物がpLKSのRep蛋白質であると推察した。 (3)L.plantarumのPhosphofructokinaseをコードするpfk遺伝子のクローニングとその構造解析を行った。本pfk遺伝子は約4kbであり、Lactococcus lactis LMO230株等のpfkと高い相同性を示した。 (4)強力な硝酸分解能を示すBarillusに属する3菌株を分離した。これらの菌株について、硝酸分解酵素遺伝子のクローニングを行っている。

Research Products
(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] 緒方靖哉: "サイレ-ジ乳酸菌の機能開発" 日本生物工学会誌. 74・4. 294-297 (1996)
[Publications] 緒方靖哉: "生物生産における遺伝子ターゲッティング" 日本農芸化学会誌. 70・8. 883-884 (1996)
[Publications] 大桃定洋: "Acremonium cellulolyticus Y-94由来のセルラーゼの添加がアルファルファサイレ-ジの発酵品質に及ぼす影響" Grassland Science. 42・2. 159-162 (1996)
[Publications] 大桃定洋: "Acremonium cellulolyticus Y-94が生産するセルラーゼの添加がイネ科牧草サイレ-ジの発酵品質に及ぼす影響" Grassland Science. 42・2. 344-348 (1996)
[Publications] 田中治: "Lactic acid productivity of the Selected Strains of the Genus Lactobacillus in a Loboratory-Scale Silages" Grassland Science. 43・1(印刷中). (1997)
[Publications] 土居克実: "サイレ-ジ乳酸菌の機能開発" 日本生物工学会乳酸菌工学研究部会講演会要旨集. 4 (1997)
[Publications] 緒方靖哉: "微生物とその利用" コロナ社, 206 (1997)
[Publications] 大桃定洋(共著): "乳酸菌の科学と技術" 学界出版センター, 4 (1996)

1996 Fiscal Year Annual Research Report

高機能サイレ-ジ乳酸菌の機能増強と実用化に関する研究

Principal Investigator

緒方 靖哉 九州大学, 農学部, 教授 (20038277)

Research Products

[Publications] 緒方 靖哉: "サイレ-ジ乳酸菌の機能開発" 日本生物工学会誌. 74・4. 294-297 (1996)

[Publications] 緒方 靖哉: "生物生産における遺伝子ターゲッティング" 日本農芸化学会誌. 70・8. 883-884 (1996)

[Publications] 大桃 定洋: "Acremonium cellulolyticus Y-94由来のセルラーゼの添加がアルファルファサイレ-ジの発酵品質に及ぼす影響" Grassland Science. 42・2. 159-162 (1996)

[Publications] 大桃 定洋: "Acremonium cellulolyticus Y-94が生産するセルラーゼの添加がイネ科牧草サイレ-ジの発酵品質に及ぼす影響" Grassland Science. 42・2. 344-348 (1996)

[Publications] 田中 治: "Lactic acid productivity of the Selected Strains of the Genus Lactobacillus in a Loboratory-Scale Silages" Grassland Science. 43・1(印刷中). (1997)

[Publications] 土居 克実: "サイレ-ジ乳酸菌の機能開発" 日本生物工学会乳酸菌工学研究部会講演会要旨集. 4 (1997)

[Publications] 緒方 靖哉: "微生物とその利用" コロナ社, 206 (1997)

[Publications] 大桃 定洋(共著): "乳酸菌の科学と技術" 学界出版センター, 4 (1996)

緒方靖哉九州大学, 農学部, 教授 (20038277)

[Publications] 緒方靖哉: "サイレ-ジ乳酸菌の機能開発" 日本生物工学会誌. 74・4. 294-297 (1996)

[Publications] 緒方靖哉: "生物生産における遺伝子ターゲッティング" 日本農芸化学会誌. 70・8. 883-884 (1996)

[Publications] 大桃定洋: "Acremonium cellulolyticus Y-94由来のセルラーゼの添加がアルファルファサイレ-ジの発酵品質に及ぼす影響" Grassland Science. 42・2. 159-162 (1996)

[Publications] 大桃定洋: "Acremonium cellulolyticus Y-94が生産するセルラーゼの添加がイネ科牧草サイレ-ジの発酵品質に及ぼす影響" Grassland Science. 42・2. 344-348 (1996)

[Publications] 田中治: "Lactic acid productivity of the Selected Strains of the Genus Lactobacillus in a Loboratory-Scale Silages" Grassland Science. 43・1(印刷中). (1997)

[Publications] 土居克実: "サイレ-ジ乳酸菌の機能開発" 日本生物工学会乳酸菌工学研究部会講演会要旨集. 4 (1997)

[Publications] 緒方靖哉: "微生物とその利用" コロナ社, 206 (1997)

[Publications] 大桃定洋(共著): "乳酸菌の科学と技術" 学界出版センター, 4 (1996)