1997 Fiscal Year Annual Research Report
高機能サイレ-ジ乳酸菌の機能増強と実用化に関する研究
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07556094
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| Research Institution | KYUSHU UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
緒方 靖哉 九州大学, 農学部, 教授 (20038277)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田中 治 農林水産省草地試験場, 研究員
大桃 定洋 農林水産省畜産試験場, 研究員
土居 克美 九州大学, 農学部, 講師 (40253520)
増田 泰久 九州大学, 農学部, 教授 (60038263)
藤尾 雄策 九州大学, 農学部, 教授 (90038224)
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| Keywords | サイレ-ジ / 乳酸菌生剤 / 高機能性乳酸菌 / ファージ耐性プラスミド / 硝酸分解性菌 / 組換え体 / 育種 / 実用化 |
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| Research Abstract |
西南暖地型気候に適応したサイレ-ジ乳酸稈菌(乳酸菌生剤)の開発を目的として、西日本及び沖縄地方から高湿耐性・高乳酸発酵性NGRI株80株を分離し、これらの高機能化と実用化を目指して下記の成果を得た。
(1)分離菌株の種名を決定し、L.plantarum、L.pentosus、L.casei、L.rhamnosusに属することを明らかにした。Phosphofructokinase(PFK)遺伝子の保存領域もこれら菌種間の同定に有意であった。
(2)L.plntarum NGRI0101 株の保持するファージ耐性プラスミドpLKS(2.1kbp)のori配列やrep遺伝子等の構造と機能を明らかにし、さらにpLKSの複製様式及びpLKSの有するファージ耐性がrep機能間の拮抗に起因する機構を推定した。
(3)サイレ-ジ発酵におけるファージ汚染の防除対策の一方法として、プラスミドpLKS及びそのファージ耐性遺伝子の利用の有効性を示した。さらに、pLKSと大腸菌のpUC119ベクターを連結した組換えプラスミドpUCLSEmは大腸菌、乳酸菌の両方で複製が可能であることにより、乳酸菌-大腸菌間のシャトルベクターでかつファージ耐性を有したベクターになることを示した。
(4)牧草由来のサイレ-ジ中の過剰NO_3^-態窒素をサイレ-ジ発酵過程で微生物的に低減化することを目的とし、硝酸還元性菌Bacillus licheniformis No.16を分離した。その性質とNO_3^-態窒素分解能に優れていることを示した。また、本菌株の硝酸還元酵素オペロンnarHのクローニングを行った。
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[Publications] 緒方靖哉 他: "サイレ-ジ乳酸菌の機能開発-ファージタイピングによる簡便な同定法の開発および高機能サイレ-ジ菌株作出-" 生物工学会誌. 75・5. 361-363 (1997)
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[Publications] 大桃定洋 他: "サイレ-ジ発酵用乳酸菌に求められる能力とその探索" J.Jpn.Study G.LAB. 7・2. 72-78 (1997)
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[Publications] 大桃定洋 他: "Effect of salt tolerant lactic acid bacteria and salt on the fermentation characteristics and aerobic stability of Silages" J.Appl.Microbiol.83. 307-313 (1997)
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[Publications] 田中 治 他: "Lactic acid productivity of the selected strains of the Genus Lactobacillus in Laboratory-scale silages" Glassl.Sci. 43・3. 327-377 (1997)
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[Publications] 緒方靖哉 他: "A conjugative linear plasmid in S.laurentii ATCC 31255" Biosci.Biotech.Biochem.61・9. 1469-1473 (1997)
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[Publications] 緒方靖哉 他: "サイレ-ジ乳酸菌の機能開発-付与有用形質の分離と応用-" 生物工学会誌. 76・11(印刷中). (1998)
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[Publications] 緒方靖哉: "微生物とその利用" コロナ社, 194 (1997)
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[Publications] 大桃定洋: "畜産総合事典" 朝倉書店, 8(686-694) (1997)
