1996 Fiscal Year Annual Research Report

生体組織での一酸化窒素(NO)連続測定用NO電極の開発

Research Project

Project/Area Number	07557006
Research Institution	Tokai University School of Medicine
Principal Investigator	中澤博江東海大学, 医学部, 教授 (20110885)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	石田英之東海大学, 医学部, 講師 (20222424) 一守康史東海大学, 医学部, 講師 (60184636)
Keywords	スーパーオキサイド / 一酸化窒素 / NO / Cytotoxicity / パーオキシナイトライト
Research Abstract	NO電極の原理は、NOの電解酸化のNO+2H_2O→NO_<3->+4H_+3e_-に基づく。陽極に3層構造のNO選択膜で覆った0.2mmφPT/Ir合金を、陰極(対極)に炭素繊維を用いた。疎水性膜の被覆により水溶性物質の電極への接触を阻止し、ガス状小分子が選択的に陽極に到達出来るようにし、作用電極に0.4〜+0.8Vの正の電圧を加えることによりO_2分子などの他のガス分子と区別した。また、NOを定常的に発生するS-nitroso-N-acethyl-d1-penicillamine(SNAP)を感度測定のために標準溶液とした。作成したNO電極でNOの10nMレベルまでを安定して測定出来る感度が得られた。SNAPに紫外光照射してNOをバーストで発生させた後の電流の減衰曲線から電極反応の時定数を測定することが出来た。時定数は、1.14±0.09秒であった。輪状大動脈切片からのNO生成の動的状態を測定できた。感度は、S/N=1に対応するNO濃度が6.5nMとなる所まで上げることが出来た。また、時定数も1秒付近まで短くさせることが出来た。ノイズに関しては、不感電極を弱アルカリ性の薄い電解質溶液を含むガラスに封入する事により、飛躍的にノイズを除去する事が出来た。安定性に対しては、物理的、機械的変化によるドリフトの除去はまだ困難であった。このため、生体系では計測はNO電極の操作に習熟した実験者でないと安定した成績を得ることが出来ない欠点がある。この点に関しては、プレート型の電極を用いた検討がまだ不充分であった。今回はプレート型の改良により安定することを試みた。これにより多少の改善はあったが生体系からのreal-time測定においてはまだ感度が不充分であった。実際はラット摘出大動脈、ラット肝臓、ラット摘出灌流心で試みみたがNOの検証レベルに比してノイズが大であった。

Research Products
(29 results)

All Other

All Publications (29 results)

[Publications] Iida T,et al: "Polymorphonuclear cells in chronic hemodialysis patients have in-tact phagocytotic and impaired bactericidal activities" Nephron. 75. 41-47 (1997)
[Publications] Fukuyama N,et al: "Clinical evidence of peroxynitrite formation in chronic renal failure patients with septic shock. Free Radic" Free Radic Biol Med. 22. 771-774 (1997)
[Publications] Yamashita T,et al: "Role of EDRF/NO in regional vascular resistance in pharmcologi-cally denervated rats." Pathophysiology. 3. 149-156 (1996)
[Publications] Kashem A,et al: "The effect of dialysate glucose on phagocytes superoxide generation in CAPD patients." Periton dialysis Int. <<in press>>.
[Publications] Minhaz U,et al: "Effect of MCI-186 on postishemic reperfusion injury in isolated rat heart." Free Rad Res. 5. 361-367 (1996)
[Publications] Kushibiki Y,et al: "Molecular cloning of oxygen-inducible genes in caenorhabditis ele-gans by RT-PCR differntial display." Pathophysiology. 3. 107-110 (1996)
[Publications] Minhaz U,et al: "Early reperfusion induces alveolar injury in pulmonay embolism." Chest. (in press).
[Publications] Ishiyama S,et al: "Nitric Oxide contributes to the progression of myocardial damage in experimental autoimmune myocarditis in rats." Circulation. (in press).
[Publications] Kashem A,et al: "Superoxide dismutase activity in human glomerulonephritis." Am J Kidney Dis. 1. 14-22 (1996)
[Publications] Fukuyama N,et al: "Peroxinitrite formation from activated human leukocytes." Biochen Bioph Res Co. 224. 414-419 (1996)
[Publications] Takizawa S,et al: "Glutamate-related and -unrelated nitric oxide production in tran-sient forebrain ischemia." Journal of Stroke and Cerebrovascular Disease. 1. 43-46 (1996)
[Publications] Mori H,et al: "Small vessel radiography in situ with monochromatic synchrotron radiation." Radiology. 3. 173-177 (1996)
[Publications] Sato T,et al: "Hydrocarbon chain-dependent antagonism of acylcarnitines to the depressant effect of lysophoshatidylcholine on cardiac sodium current." J Moll Cell Cardiol. 28. 2183-2194 (1996)
[Publications] Nakazawa H,et al: "Pathological aspects of active oxygens/free radicals" Jpn J Physiol. 46. 15-32 (1996)
[Publications] Ishida H,et al: "Peroxynitrite-induced cardiac myocyte injury." Free Radic Biol Med. 20. 343-350 (1996)
[Publications] 石田英之、蘇志、ら: "Peroxynitriteの心筋細胞障害性" 血管と内皮. 6. 22-29 (1996)
[Publications] 一守康史、藤嶋美奈子、ら: "電極法、ミオグロビン吸光法によるNOの測定とその問題点" 血管と内皮. 6. 84-91 (1996)
[Publications] 一守康史、星合清隆、ら: "一酸化窒素の科学-活性酸素と相互作用-" G.I.Research. 4. 9-16 (1996)
[Publications] 中澤博江: "甲状腺機能障害" Medicine. 33. 975-977 (1996)
[Publications] 藤嶋美奈子、中澤博江: "検査、診断、治療のストラテジー" Medicina. 9. 1649-1651 (1996)
[Publications] 田中越郎、盛英三、ら: "心交感神経刺激時の神経伝達物質の動態と冠血管収縮" 呼吸と循環. 11. 1183-1188 (1996)
[Publications] 伴和信、吉武基之、ら: "冠循環とフリーラジカル" 循環器科. 40. 561-566 (1996)
[Publications] 星合清隆、中澤博江、ら: "心筋虚血" 臨床検査. 2. 166-170 (1996)
[Publications] 石田英之、蘇志、ら: "Peroxynitriteの心筋細胞障害性" 血管と内皮. 6. 22-29 (1996)
[Publications] 一守康史、藤嶋美奈子、ら: "電極法、ミオグロビン吸光法によるNOの測定とその問題点" 血管と内皮. 6. 84-91 (1996)
[Publications] 一守康史、星合清隆: "一酸化窒素の科学-活性酸素と相互作用-" G.I.Research. 4. 9-16 (1996)
[Publications] 中澤博江吉川敏一: "日本医学館" 磁気共鳴と医学vol7, (1996)
[Publications] Ichimori K,et al: "Academic Press" Methods of Enzymology 28, (1996)
[Publications] Takizawa,S,et al: "Academic Press" Free Radicals in Brain Physiology and Disorders, (1996)

1996 Fiscal Year Annual Research Report

生体組織での一酸化窒素(NO)連続測定用NO電極の開発

Principal Investigator

中澤 博江 東海大学, 医学部, 教授 (20110885)

Research Products

[Publications] Iida T,et al: "Polymorphonuclear cells in chronic hemodialysis patients have in-tact phagocytotic and impaired bactericidal activities" Nephron. 75. 41-47 (1997)

[Publications] Fukuyama N,et al: "Clinical evidence of peroxynitrite formation in chronic renal failure patients with septic shock. Free Radic" Free Radic Biol Med. 22. 771-774 (1997)

[Publications] Yamashita T,et al: "Role of EDRF/NO in regional vascular resistance in pharmcologi-cally denervated rats." Pathophysiology. 3. 149-156 (1996)

[Publications] Kashem A,et al: "The effect of dialysate glucose on phagocytes superoxide generation in CAPD patients." Periton dialysis Int. <<in press>>.

[Publications] Minhaz U,et al: "Effect of MCI-186 on postishemic reperfusion injury in isolated rat heart." Free Rad Res. 5. 361-367 (1996)

[Publications] Kushibiki Y,et al: "Molecular cloning of oxygen-inducible genes in caenorhabditis ele-gans by RT-PCR differntial display." Pathophysiology. 3. 107-110 (1996)

[Publications] Minhaz U,et al: "Early reperfusion induces alveolar injury in pulmonay embolism." Chest. (in press).

[Publications] Ishiyama S,et al: "Nitric Oxide contributes to the progression of myocardial damage in experimental autoimmune myocarditis in rats." Circulation. (in press).

[Publications] Kashem A,et al: "Superoxide dismutase activity in human glomerulonephritis." Am J Kidney Dis. 1. 14-22 (1996)

[Publications] Fukuyama N,et al: "Peroxinitrite formation from activated human leukocytes." Biochen Bioph Res Co. 224. 414-419 (1996)

[Publications] Takizawa S,et al: "Glutamate-related and -unrelated nitric oxide production in tran-sient forebrain ischemia." Journal of Stroke and Cerebrovascular Disease. 1. 43-46 (1996)

[Publications] Mori H,et al: "Small vessel radiography in situ with monochromatic synchrotron radiation." Radiology. 3. 173-177 (1996)

[Publications] Sato T,et al: "Hydrocarbon chain-dependent antagonism of acylcarnitines to the depressant effect of lysophoshatidylcholine on cardiac sodium current." J Moll Cell Cardiol. 28. 2183-2194 (1996)

[Publications] Nakazawa H,et al: "Pathological aspects of active oxygens/free radicals" Jpn J Physiol. 46. 15-32 (1996)

[Publications] Ishida H,et al: "Peroxynitrite-induced cardiac myocyte injury." Free Radic Biol Med. 20. 343-350 (1996)

[Publications] 石田英之、蘇志、ら: "Peroxynitriteの心筋細胞障害性" 血管と内皮. 6. 22-29 (1996)

[Publications] 一守康史、藤嶋美奈子、ら: "電極法、ミオグロビン吸光法によるNOの測定とその問題点" 血管と内皮. 6. 84-91 (1996)

[Publications] 一守康史、星合清隆、ら: "一酸化窒素の科学-活性酸素と相互作用-" G.I.Research. 4. 9-16 (1996)

[Publications] 中澤博江: "甲状腺機能障害" Medicine. 33. 975-977 (1996)

[Publications] 藤嶋美奈子、中澤博江: "検査、診断、治療のストラテジー" Medicina. 9. 1649-1651 (1996)

[Publications] 田中越郎、盛英三、ら: "心交感神経刺激時の神経伝達物質の動態と冠血管収縮" 呼吸と循環. 11. 1183-1188 (1996)

[Publications] 伴和信、吉武基之、ら: "冠循環とフリーラジカル" 循環器科. 40. 561-566 (1996)

[Publications] 星合清隆、中澤博江、ら: "心筋虚血" 臨床検査. 2. 166-170 (1996)

[Publications] 石田英之、蘇志、ら: "Peroxynitriteの心筋細胞障害性" 血管と内皮. 6. 22-29 (1996)

[Publications] 一守康史、藤嶋美奈子、ら: "電極法、ミオグロビン吸光法によるNOの測定とその問題点" 血管と内皮. 6. 84-91 (1996)

[Publications] 一守康史、星合清隆: "一酸化窒素の科学-活性酸素と相互作用-" G.I.Research. 4. 9-16 (1996)

[Publications] 中澤博江 吉川敏一: "日本医学館" 磁気共鳴と医学vol7, (1996)

[Publications] Ichimori K,et al: "Academic Press" Methods of Enzymology 28, (1996)

[Publications] Takizawa,S,et al: "Academic Press" Free Radicals in Brain Physiology and Disorders, (1996)

中澤博江東海大学, 医学部, 教授 (20110885)

[Publications] 中澤博江吉川敏一: "日本医学館" 磁気共鳴と医学vol7, (1996)