1996 Fiscal Year Annual Research Report
ラット褐色脂肪細胞の熱産生,脂質代謝,細胞内イオン変動に及ぼす寒冷曝露の影響
| Project/Area Number |
07670095
|
|---|
| Research Institution | HYOGO COLLEGE OF MEDICINE |
|---|
Principal Investigator |
堀 清記 兵庫医科大学, 医学部, 教授 (80068452)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
堀 和子 兵庫医科大学, 医学部, 講師 (30068514)
辻田 純三 兵庫医科大学, 医学部, 助手 (30104235)
佐々木 貞雄 兵庫医科大学, 医学部, 助教授 (20104276)
|
|---|
| Keywords | 褐色脂肪細胞 / 熱産生 / 細胞内イオン濃度 / 寒冷曝露 / サーモヂェニン / 脂肪代謝 |
|---|
| Research Abstract |
温暖あるいは寒冷順化およびノルアドレナリン,グルカゴン等のアゴニスト、ホルモンを投与したラットを作製,飼育し,その代謝機能を測定した後,褐色脂肪組織を採取した.その後細胞分画法によって褐色脂肪細胞より糸粒体,小胞体分画等を調整した.
まず糸粒体,小胞体分画をリン脂質(フォスファチジルコリン等)で作った人工膜に埋め込み,そのままの状態で,外液のpHを変動させた時にK^+やCl^-電流のような電流が流れているかをパッチクランプ法で検討した。その結果、糸粒体膜にはH^+感受性の陽イオンチャネルとCl^-チャネルの存在をみとめた。
またサーモゲニンのmRNAをノーザンブロットで測定した結果,寒冷馴化によりそれは増加したが再温暖馴化では殆ど減少しなかった.
一方褐色脂肪細胞のスライスを作製し,Ca^<2+>感受性色素のfluo3やH^+感受性色素のアクリダインオレンジを用いて共焦点レーザー顕微鏡下に褐色脂肪細胞内Ca^<2+>濃度およびH^+濃度勾配を測定した.
また,褐色脂肪細胞の無固定の新鮮凍結切片を作成し,電子顕微鏡にて電子プローブX線微小部分析を行い,糸粒体,小胞体内のCa,Cl等の電解質の濃度分布を検討した.糸粒体のCa濃度は寒冷馴化で増加し核で減少した。
これらの研究をさらに押し進めると共にパッチクランプ法,X線微小部分析法によるデータの検討を行い,糸粒体及び生体機能調節時のイオン動態の概略を把握し,対応する寒冷順化及びホルモン投与との関連を追求した。また以上の研究成果を国内学会および国際学会で発表し,論文として国内,国外の専門誌に発表した。
|
-
[Publications] Hori,S.: "Adaptation to heat." Jpn.J.Physiol.45(6). 921-946 (1995)
-
[Publications] Sasaki,S,Nakagaki.I.,Kaya,M.,Takemura,M.,Koyama,K.,Tsujita,J.Hori,S.,Yahata,T.,Kuroshima,A.: "Ion transport,lipid metabolism and heat production in mitochondrial membrane during cold acclimation in rat brown adipose tissue cells." Jpn.J.Physiol.,. 46Suppl.,. S214- (1996)
-
[Publications] Sasaki,S.,Nakagaki,I.,Kondo,K.,Hori,S.: "Changes in element concentrations induced by agonist in pig panctratic acinar cells." Pflugers Arch.,. 432. 538-545 (1996)
-
[Publications] Sasaki,S.,Nakagaki,I.,Hori,K.,Tsujita,J.,Hori,S.,Yahata,T.,Kuroshima,A.: "Intracellular ion transport in mitochondrial membrane during cold acclimation in rat brown adipose tissue." Ed.Nagasaka,T.& Milton,A.S.In : Body temperature and metabolism,. IPEC Inc.,Tokyo,. 203-206 (1995)
-
[Publications] 中垣育子、佐々木貞雄、高屋豊、賀屋光晴、武村正徳、他: "ラット褐色脂肪細胞の細胞内イオン変動に及ぼす 寒冷曝露の影響" 日本生気象学会雑誌、. 32(3). S46- (1995)
-
[Publications] 堀和子、佐々木貞雄、中垣育子、辻田純三、小山勝弘、他: "寒冷順化にともなうラット褐色脂肪細胞の形態およびサーモジェニン、細胞内イオンの動態" 第18回日本分子生物学会、. 451- (1995)
