糖尿病性腎症の成因における腎AGEsの関与

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07671150
• Research Institution: KYOTO PREFECTURAL UNIVERSITY OF MEDICINE
• Principal Investigator: 中埜 幸治 京都府立医科大学, 医学部, 講師 (00137134)
• Keywords: 糖尿病性腎症 / SZ糖尿病ラット / AGEs / クロスリン / NO合成酵素 / 拮抗ELISA法 / 糖尿病性合併症 / N-nitro-arginine (NNA)

Research Abstract

糖尿病性腎症の成因におけるAGEs (Advanced glycation end products)の関与について検討する目的で、AGEs構造同定物の1つであるクロスリン(XL)に対するXL抗体を用いて研究を行った。XLはlysineとlysineを架橋する2分子のD-glucoseよりなり、蛍光性(ex 379, em 463nm)を有する。XL抗体は他のAGEs構造同定物であるペントシジン,ピラリンなどとは反応しない。
(1)糖尿病性腎症成因におけるAGEsと生体NO産生の関与:ストレプトゾシン(SZ)糖尿病ラットでは、経時的にアルブミン尿排泄と腎皮質XL生成が増加した。尿中NO (U-NO3)とcGMP排泄はGFR(糸球体濾過率)が亢進している2週において増加していた。また、SZ糖尿病ラットへのNO産生阻害物質N-nitro-arginine (NNA)投与により、SZ群において増加したGFR, RBF(腎血漿流量), U-NO3は抑制された。さらに、SZ群での腎皮質NO合成酵素(C-NOS)の亢進がNNA投与により是正された。以上の結果から、腎症の成因に腎AGEs生成及びNOが関与することが示唆された。
(2)生体試料のXL定量:生体XL生成量を定量的に測定するために拮抗ELISA法を確立した。本法によりヒトおよび動物の血清、赤血球膜蛋白および組織蛋白中のXL生成量を高感度で測定(pmol/mg)でき、糖尿病では非糖尿病に比しこれら蛋白中XL生成量が増加していることが判明した。今後腎症を含めて糖尿病性合併症発症機序におけるAGEsの関与を前向き研究で検討できる。

Research Products

• [Publications] Obayashi H: "Formation of crossline as a flouresent advanced glycation end products in vitro and in vivo" Biochem Biophys Res Commun. 226. 37-41 (1996)
• [Publications] Ienaga K: "Crossline-like structure accumulates as a fluoresent advanced glycation end products in renal tissues of rat with diabetic nephropathy" Proc Japan Acad. 72B. 79-84 (1996)
• [Publications] Nakamura K: "Diabetic renal failure and serum accumulation of the creatine oxidative metabolites creatol and methylguanidine" Nephron. 73. 520-525 (1996)
• [Publications] 長谷川剛二: "糖尿病性血管新生と増殖因子" 腎と透析, 5 (1996)