遺伝子操作下増殖型胎児肝細胞移植による肝硬変に対する新しい治療の開発

1995 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07671353
• Research Category: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 大河内 信弘 東北大学, 医学部, 講師 (40213673)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 土井 秀之 東北大学, 医学部・付属病院, 助手 (90188839) ; 加藤 博孝 東北大学, 医学部・付属病院, 助手 (00240656) ; 標葉 隆三郎 東北大学, 医学部, 講師 (20192106) ; 里見 進 東北大学, 医学部, 教授 (00154120)
• Keywords: 肝硬変 / 遺伝子治療 / 肝細胞移植

Research Abstract

平成7年度の研究成果
1.マウス、ラットに四塩化炭素を長期投与し、硬変肝モデルを作製した。また両硬変肝モデルを用いて30%、70%肝切除をおこない70%肝切除では生存し得ないことを明らかにした。
2.上記の硬変肝作製過程ならびに、四塩化炭素中止後3か月間経時的に血液をサンプリングし肝繊維化の律速酵素の一つであるハイドロオキシ・プロリル・デハドロゲナーゼの酵素活性を測定し、肝の繊維化の過程およびその消失過程におけるハイドロオキシ・プロリル・デハドロゲナーゼの酵素活性変化を観察した。その結果硬変肝の作成過程で硬変肝の程度とハイドロオキシ・プロリル・デハドロゲナーゼの活性が相関して増加することを明らかにした。
3.実験2と同様に硬変肝作製過程ならびに、四塩化炭素中止後3か月間経時的に肝臓をサンプリングし、肝繊維化のマーカーであるコラーゲン量、コラゲナーゼ活性、コラーゲン・インヒビター活性を測定中である。
4.マウス胎児肝細胞の分化誘導実験をおこない、この胎児肝細胞株が肝の上皮系細胞に分化することを明らかにした。
5.移入細胞作製のために新たにレーザー光による選択的細胞融合装置を開発中である。
今年度の研究の評価と今後の展開
硬変肝に対する遺伝子治療を行うための基礎となる、マウスおよびラットにおける正常肝に変化していく過程、ならびにその治療過程で、コラーゲン、コラゲナーゼ、その合成酵素がどの様に変化していくことに関する研究はほぼ予定どおり進んだ。しかし、コラゲナーゼ・インヒビターのmRNAの分析、このmRNAに対するアンチセンス・クレオチドの合成に関する研究が遅れており、平成8年度に持ち越された。