1997 Fiscal Year Annual Research Report
C型肝炎ウイルスのin vitro増殖系の樹立とその基礎応用
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08457067
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| Research Institution | Nihon University School of Medicine |
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Principal Investigator |
内田 俊和 日本大学, 医学部, 助教授 (80060078)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
杉谷 雅彦 日本大学, 医学部, 講師 (40187654)
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| Keywords | C型肝炎 / B型肝炎 / サイレントB / 肺炎ウイルス / トランスフェクション |
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| Research Abstract |
我々はhepatitis C virus(HCV)に血清マーカー陰性(HBsAg陰性・サイレント)のhepatitis B virus(HBV)が高頻度(おそらく全て)に重感染している事実を発見した。HCVにサイレントHBVが高頻度に重感染しているということは、たまたま二つのウイルスが同じ経路でひとりの肝臓に感染したというのではなく、ウイルスの増殖にとってもうひとつのウイルスの存在が必要だということを意味していると想定される。その場合、サイレントHBVのみに感染し発病している患者が存在するため、サイレントHBVがHCVの感染と増殖に必要であると仮定された。そこでこのサイレントHBV DNAをクローニングし、複製可能なhead-to-tail dimerを作製し、HCV RNAとともにヒト肝細胞癌由来の樹立細胞株であるHuH-7細胞にin vitroで同時トランスフェクションし、培養上清中に分泌されるHCV RNAを定量した。コントロールとして、HCV RNAのみのトランスフェクション、HCV RNAと野生株(HBsAg陽性)HBV DNAの同時トランスフェクションを用意した。その結果、サイレントHBV DNAとのトランスフェクションはHCV RNA単独に較べ5倍までHCV RNA分泌量が多く、逆に野生株HBV DNAは同時にトランスフェクションした HCV RNAの分泌をHCV RNA単独に較べ8倍まで抑制した。この後者の現象はウイルスの相互干渉として通常観察されることである。これに対し、サイレントHBV DNAはHCV RNAの複製と発現を亢進していることが強く示唆され、この方面の今後の研究の基礎が築かれたことになる。
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[Publications] Shrestha SM,Okuda K,Uchida T,et al: "Endemicity and clinical picture of liver disease due to obstruction of the hepatic portion of the inferior vena cava in Nepal" J.Gastroenterol.Hepatol.11. 170-179 (1996)
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[Publications] Uchida T,Saitoh T,Shinzawa H: "Mutations of the X region of hepatitis B virus and their clinical implications." Pathol.Int.47. 183-193 (1997)
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[Publications] Uchida T,Kaneita Y,Gotoh K,et al.: "Hepatitis C is frequently coinfected with serum markernegative hepatitis B virus" J.Med.Virol.52. 399-405 (1997)
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[Publications] Yamagoe S,Akasaka T,Uchida T,et al.: "Expression of a neutrophil chmotatic protein LECT2 in human hepatocytes revealed by immunohistochemical studies using polyclonal and monoclonal antibodies" Biochem.Biophys.Res.Commun.237. 116-120 (1997)
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[Publications] Li T-C,Yamakawa Y,Uchida T,et al.: "Expression and self-assembly of empty virus-like particles of hepatitis C virus" J.Virol.71. 7207-7213 (1997)
