アルコール依存症の成因に関する分子生態遺伝学的研究

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 08457126
• Research Institution: University of Tsukuba
• Principal Investigator: 原田 勝二 筑波大学, 社会医学系, 助教授 (60086618)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 森田 展彰 筑波大学, 社会医学系, 講師 (10251068) ; 佐藤 親次 筑波大学, 社会医学系, 助教授 (90162437) ; 野村 文夫 筑波大学, 臨床医学系, 助教授 (80164739)
• Keywords: アルコール性肝障害 / 対照研究 / Aldehyde dehydrogenase / Promoter / Genetic polymorphism / Risk factor / MAZ / Cis-element

Research Abstract

本年度はALDH2 promoter領域中に、強力な転写活性を示すMAZが結合するcis-elementに新たな多型性変異を見い出したので、健常人とアルコール性肝障害との対照研究を行った。
アルコール性肝障害の診断基準に基づき診断された男性患者40名(肝線維症、肝硬変、肝炎)および健常者66名の血液から抽出したDNA試料を用いた。ALDH2geneの5′末端上流は約600bpの塩基配列がHsu et al.(1988)により報告されている。この領域を約300bpずつ上流と下流に分け、PCR増幅したものをDNA Sequencer(ALFexpress,Pharmacia)によりSSCP分析した。検出された変異型はすべてGenetic analyzer(ABI,310)にて塩基配列を決定した。健常者集団では-375G→Aの置換が多型として検出されたほか、稀な変異として-530C→Tが検出された。このほかHsu et al.の報告と異なる配列として-539G→Tの置換および-345Cと-346Cの間のG insertionが全例に見い出された。遺伝子頻度は健常群ではGG:39(59.1%),GA:22(33.3%),AA:5(7.6%)であるのに対し、アルコール性肝障害ではGG:7(17.5%),GA:32(80,0%),AA:1(2.5%)となり、アルコール性肝障害においてはA型変異が有意に高かった(X^2=6.78,p<0.001)。この-375G→A変異はSp1より更に強力な転写活性をもつMAZが結合するcis-element中に生じた塩基配列(GGGGAGG→GGGAAGG)であるので、転写活性に何らかの影響を及ぼし、ひいてはALDH2活性の低下につながる可能性がある。ALDH2gene転写制御領域中に見い出された変異のうちMAZbinding cis-element中の-375G→Aの変異はアルコール性肝障害に健常人より有意に高い頻度で検出されたが、今後更に精細な検討を重ねることにより、アルコール性肝障害に関与するcandidate geneのひとつとなる可能性がある。

Research Products

• [Publications] Harada S, Okubo T, et al.: "A new genetic variant in the Sp1 binding cis-element of Cholecystokinin gene promoter region and relationship to Alcoholism" Alcohol Clin Exp Res. 22(3). 93S-S96 (1998)
• [Publications] Harada S, Okubo T, et al.: "A novel genetic polymorphism of human Cholecystokinin gene and relationship to alcohol dependency" Progress in Forensic Genetics. 7. 442-445 (1998)
• [Publications] Harada S, Okubo T, et al.: "A novel polymorphism(-357 G/A)of the ALDH2 gene: Linkage disequilibrium and an association with Alcoholism" Alcohol Clin Exp Res. 23(in press).
• [Publications] Fujii C, Harada S, et al.: "Study on Parkinson's disease and alcohol drinking" Jpn.J.Alcohol & Drug Dependence. 33(6). 683-691 (1998)
• [Publications] Nomura F, Miyake M, et al.: "Long-term alcohol effects on hepatic phosphoglucomutase activities in relation to post-translational modification of the protein" Alcohol Clin Exp Res. 22. 121-124 (1998)
• [Publications] Itoga S, Nomura F, et al.: "Mutations in the exons and exon-intron junction regions of human CYP2E1 gene and Alcoholism" Alcohol Clin Exp Res. 23(in press).