1997 Fiscal Year Annual Research Report

DNA結合能を有するキネシン様蛋白質Kidの染色体分配における機能

Research Project

Project/Area Number	09279214
Research Institution	The University of Tokyo
Principal Investigator	井上純一郎東京大学, 医科学研究所, 助教授 (70176428)
Keywords	キネシン様蛋白質 / DNA結合蛋白質 / 染色体分配 / 細胞分裂
Research Abstract	Kidは、細胞内輸送蛋白質キネシンのモーター領域と相同性のある配列と、DNA結合能をあわせ持つ蛋白質である。これまでの解析から-、Kidは、細胞周期のM期後期に、染色体のセントロメア付近に存在することが、間接蛍光染色法により示されている。又、KidのDNA結合領域を細胞に高発現させると、染色体凝集や、紡錘体の形成に異常がみられる。これらのことから、KidのDNA結合能が染色体分離に重要であると推察される。そこで、Kidが認識する塩基配列を決定することを試みた。まず、PCRを応用した結合配列選別法(BSS法)を行い、合成ランダムオリゴヌクレオチドのプールの中から、Kidに特異的に結合する配列を分離した。その結果、Kidが結合するコンセンサス塩基配列を推定することが出来た。この配列は、セントロメアに繰り返し存在するa-サテライトDNAや、今までにKidが結合することが知られている、EBウイルスのoriPや、c-erbB2のプロモーター領域にも存在することが確認された。次に、Kidがセントロメアに存在するa-サテライトDNAに結合することを想定し、a-サテライトDNAをサブクローニングした。それらを、ゲルシフト法を用いて解析したところ、a-サテライトDNAにKidが結合することが明らかとなった。これらの結果から、Kidは、細胞分裂後期において、直接、染色体のセントロメア領域に結合して、染色体分配に関与する可能性が示唆された。

Research Products
(9 results)

All Other

All Publications (9 results)

[Publications] S.Aizawa: "TRAF5 and TRAF2 are involved in CD30 mediated NFκB activation." J.Biol.Chem.272. 2042-2045 (1997)
[Publications] A.N-Fujimoto: "A novel zinc finger proteins Finb is a transcriptional activator and Iocalized in nuclear bodies." Gene. 195. 267-275 (1997)
[Publications] Y.Sowa: "Retinoblastoma binding factor 1 site in the core promoter of the human Rb gene is activated by hGABP/EFTF1." Cancer Reserach. 57. 3145-3148 (1997)
[Publications] M.Baba: "Mouse germinal center B cells with the xid mutation retain responsiveness to anti-mouse CD40 antibodies but diminish IL-5 responsiveness." Int.Immunol.9. 1463-1473 (1997)
[Publications] T.Yoshimoto: "Induction of Interleukin-12 p40 transcript by CD40 ligation via activation of Nuclear Factor-κB." Eur.J.Immunol.27. 3461-3470 (1997)
[Publications] R.Horie: "A novel domain in the CD30 cytoplasmic tail mediates NFκB activation." Int.Immunol.(in press).
[Publications] S.Mizushima: "Cloning and characterization of a cDNA encoding the human homolog of tumor necrosis factor receptor-associated factor 5 (TRAF5)." Gene. (in press).
[Publications] K.Suzuki: "Identification and expression of the Xenopus homolog of mammalian p100-NFκB2." Gene. (in press).
[Publications] M.Kashiwada: "Tumor necrosis factor receptor-associated factor 6 (TRAF6) stimulates extracellular signal-regu-lated kinase (ERK) activity in CD40 signaling along Ras-independent pathway." J.Exp.Med.(in press).

1997 Fiscal Year Annual Research Report

DNA結合能を有するキネシン様蛋白質Kidの染色体分配における機能

Principal Investigator

井上 純一郎 東京大学, 医科学研究所, 助教授 (70176428)

Research Products

[Publications] S.Aizawa: "TRAF5 and TRAF2 are involved in CD30 mediated NFκB activation." J.Biol.Chem.272. 2042-2045 (1997)

[Publications] A.N-Fujimoto: "A novel zinc finger proteins Finb is a transcriptional activator and Iocalized in nuclear bodies." Gene. 195. 267-275 (1997)

[Publications] Y.Sowa: "Retinoblastoma binding factor 1 site in the core promoter of the human Rb gene is activated by hGABP/EFTF1." Cancer Reserach. 57. 3145-3148 (1997)

[Publications] M.Baba: "Mouse germinal center B cells with the xid mutation retain responsiveness to anti-mouse CD40 antibodies but diminish IL-5 responsiveness." Int.Immunol.9. 1463-1473 (1997)

[Publications] T.Yoshimoto: "Induction of Interleukin-12 p40 transcript by CD40 ligation via activation of Nuclear Factor-κB." Eur.J.Immunol.27. 3461-3470 (1997)

[Publications] R.Horie: "A novel domain in the CD30 cytoplasmic tail mediates NFκB activation." Int.Immunol.(in press).

[Publications] S.Mizushima: "Cloning and characterization of a cDNA encoding the human homolog of tumor necrosis factor receptor-associated factor 5 (TRAF5)." Gene. (in press).

[Publications] K.Suzuki: "Identification and expression of the Xenopus homolog of mammalian p100-NFκB2." Gene. (in press).

[Publications] M.Kashiwada: "Tumor necrosis factor receptor-associated factor 6 (TRAF6) stimulates extracellular signal-regu-lated kinase (ERK) activity in CD40 signaling along Ras-independent pathway." J.Exp.Med.(in press).

井上純一郎東京大学, 医科学研究所, 助教授 (70176428)