小型霊長類を用いたヒト疾患治療モデルシステムの開発

1998 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09307020
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 浅野 茂隆 東京大学, 医科学研究所, 教授 (50134614)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 谷岡 功邦 東京大学, 実験動物中央研究所, センター長 (10072406) ; 北村 俊雄 東京大学, 医科学研究所, 客員助教授 (20282527) ; 高橋 恒夫 東京大学, 医科学研究所, 客員教授 (50291307) ; 吉川 泰弘 東京大学, 医学部, 教授 (80109975) ; 谷 憲三朗 東京大学, 医科学研究所, 助教授 (00183864)
• Keywords: コモンマーモセット / c-kit / CD34 / 主要組織適合遺伝子複合体 / PCR-SSCP / ヒト疾患モデル / BCR / ABLレトロウイルス / 複製可能レトロウイルス

Research Abstract

当該研究期間に以下の結果を得た。(1)コモンマーモセットの免疫・血液学的所見のヒトとの比較:入手可能な抗ヒト各種血球細胞抗体を用いて、FACS法にてコモンマーモセットの末梢血細胞への交差性を検討したところ約半分の抗体に交差性を認めた。(2)コモンマーモセット・多能性造血幹細胞の自己複製・分化制御機構の解析:コモンマーモセットc-kit、ならびにCD34cDNAの全長をクローン化した。現在これらcDNAより合成した蛋白質を認識する単クローン抗体を作製中である。(3)コモンマーモセットの主要組織適合遺伝子複合体(MHC)の解析:コモンマーモセット末梢白血球細胞核酸成分のPCR増幅産物を用い、PCR-SSCP(Single Strand Conformation Polymorphism)法により、コモンマーモセットMHCクラスII抗原分子遺伝子の多型性検索をほぼ終了し、一部のクラスI抗原の検索を実施中である。(4)コモンマーモセットでの各種ヒト疾患モデルの作製:ヒト白血病の責任融合遺伝子BCR/ABLレトロウイルス発現ベクターを作製し、コモンマーモセット造血幹細胞に責任遺伝子を導入し、幹細胞移植した。現在白血病発生の有無の長期観察中である。またウシII型コラーゲンの皮内接種によりリウマチ様関節炎を発症させることに成功した。現在アデノウイルスベクターを用いて関節内にマーカー遺伝子や治療用サイトカイン遺伝子を導入中である。(5)コモンマーモセットの内因性レトロウイルスの検索、ならびに新規遺伝子治療用ベクターのin vivo動態の分析:複製可能レトロウイルス(RCR)の出現の有無を多剤耐性遺伝子導入末梢血造血幹細胞移植コモンマーモセットの末梢血単核球を用いて、Mus Dunni増幅試験後のS+L-アッセイ法で検討した。末梢血造血幹細胞移植後約3年間にわたり、どのサンプルにもRCRの出現は認められていない。

Research Products

• [Publications] Azuma J, Asano S., et al.: "The effect of Y-25510 injection on the serum levels of some cytokines in healthy adult volunteer." Eur J Clin Pharmacol. 53. 411-419 (1998)
• [Publications] Hibino H, Asano S., et al.: "Characterization and gene transduction of common marmoset hematopoietic progenitor cells : small primate models for studying human gene therapy." Blood. (in press). (1998)
• [Publications] Takahashi S, Asano S., et al.: "Recombinant human granulocyte-colony stimulating factor (G-CSF) combined conditioning regimen for allogeneic bone marrow transplantation (BMT) in standard-risk myeloid leukemial" Am J Hematol. 57 (in press). (1998)
• [Publications] Nishihara M, Asano S., et al.: "A combination of stem cell factor and granulocyte colony-stimulating factor enhances the growth of human progenitor B cells supported by murine stromal cell line MS-5." Eur J Immunol. 28. 855-864 (1998)
• [Publications] Taniguchi T, Asano S., et al.: "Cyclin D1 overexpression detected by a simple competitive reverse transcription-polymerase chain reaction assay for lymphoid malignacies." Jpn J Cancer Res. 89. 159-166 (1998)
• [Publications] 浅野 茂隆、谷 憲三朗、山下 直秀、: "遺伝子治療学 (J.A.ウォルフ編)" シュプリンガーフェアラーク東京, (1998)