Entamoeba dispar感染に関する細胞生物学的、疫学的、臨床的研究

1997 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 09470072
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 竹内 勤 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (00051847)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 野崎 智義 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (60198588) ; 小林 正規 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (70112688) ; 浅井 隆志 慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (50175163) ; 田辺 将信 慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (80051928)
• Keywords: アメーバ / Entamoeba dispar / Entamoeba histolytica / 無菌培養 / Glycogen particle / モノクローナル抗体

Research Abstract

本年度はEntamoeba dispar感染に関して研究を行い、以下のような成果を得た。(1)E.disparの無菌培養系の改良については6-phosphogluconate(6-PG)がYI-S medium中での増殖に必須である事がわかり、完全な無菌化に成功した。また6-PGおよびグルコース-6ーリン酸の代謝に関する酵素系に予備的な検討を加えた。(2)電顕的に検討し、E.disparとE.histolyticaとの間にはglycogen particleの分布に大きな差異がある事が明らかになった。前者では細胞内小器官が中心に位置し、周辺をglycogen particleが取り囲んでいる像が得られた。後者ではglycogen particleは細胞質内に一様に分布していた。またグリコーゲンの含有量に関しても両者の間には大きな差異があり、前者の方が蛋白質の単位濃度あたり数倍高い含有量を示した。(3)E.disparに特異的なモノクローナル抗体(ED-17)はE.disparとCrithidia fasciculataとのmonoxenic cultureで評価したが、食胞内で処理されつつあるCrithidiaの周辺に免疫電顕によって抗原が見いだされた。またこのモノクローナル抗体はE.histolytica特異的なモノクローナル抗体と併用することによって、両者の混合感染をも的確に評価できる事が明らかになった。(5)両種のアメーバのDNA polymeraseに関して比較検討したが、酵素学的な性質に大きな差異は見いだせず、似通った性質を持つことが明らかになった。(6)E.histolyticaとE.disparのcodon usageをE.invadensと比較検討した結果、前2者は類似していたが、E.invadensとは有意な差異がある事が判明した。

Research Products

• [Publications] 牧岡朝夫: "Comparison of DNA polymerase between Entamoeba histolytica and E.dispar" Parasitology International. 46-1. 27-30 (1997)
• [Publications] 竹内勤: "Entamoeba dispar : Cultivation without viable associate" Archives of Medical Research. 28-suppl. 108-109 (1997)
• [Publications] 佐貫潤一: "Identification of Entamoeba histolytica and E.dispar cysts in stool by polymerase chain reaction" Parasitology Research. 83-2. 96-98 (1997)
• [Publications] 野崎智義: "Codon usage in Entamoeba histolytica,E.dispar and E.invadens" Parasitology International. 46-2. 105-107 (1997)
• [Publications] 橘裕司: "Preparation of a monoclonal antibody specific for Entamoeba dispar and its ability to distinguish E.dispar from E.histolytica." Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. 4-3. 404-414 (1997)
• [Publications] 小林正規: "Entamoeba dispar ; Cultivation with sterilized Crithidia fasciculata" Journal of Eukaryotic Microbiology. 45-1. 173-178 (1998)