1998 Fiscal Year Annual Research Report

Entamoeba dispar感染に関する細胞生物学的,疫学的,臨床的研究

Research Project

Project/Area Number	09470072
Research Institution	Keio University
Principal Investigator	竹内勤慶應義塾大学, 医学部, 教授 (00051847)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	野崎智義慶応義塾大学, 医学部, 助手 (60198588) 小林正規慶応義塾大学, 医学部, 助手 (70112688) 浅井隆志慶応義塾大学, 医学部, 専任講師 (50175163) 田辺将信慶応義塾大学, 医学部, 専任講師 (80051928)
Keywords	アメーバ / Entamoeba dispar / Entamoeba histolytica / 無菌培養 / システイン合成系
Research Abstract	(1) Entamoeba disparの培養システムの改良:従来のYI-S mediumを基礎として、これにso-dium gluconate、dihydroxyacetoneをそれぞれ0.5%、0.1%の最終濃度で加えたYIGADHA-Smediumを開発した。この培地によって4株のE.disparの完全な無菌培養が可能となった。更に予備的な段階であるが、YIGADHA-S mediumにコンドロイチン硫酸を0.1%の濃度で添加することによって、E.disparの増殖をCrithidia fasciculataが共存するmonoxenic cul-tureにおけるのと同様なレベルにまで引き上げることができた。 (2) E.disparの性状に関する分子レベルでの検討:従来の研究によってシステイン合成酵素遺伝子の塩基配列を明らかにし、E.histolticaとE.disparの間には数%の差異が存在することを明らかにした。今年度はやはりシステイン合成系の酵素であるATP sulfrylaseとSerine-acetyl transferaseの遺伝子をクローニングし塩基配列を明らかにした。その結果やはり塩基配列に差異が見られ、最も変異の激しい部分を利用してPCRによるサブポピュレーションの同定方法の開発も行なった。またDNA polymeraseの性状などに関しても検討を加えた。 (3) E.disparのvirulenceに関する検討:上記の培地で完全に無菌条件下で培養した栄養型虫体を用いてハムスター肝に直接注射して肝膿瘍形成を見た。その結果免疫機能が正常な場合は何ら病変が形成されなかった。現在、種々の免疫不全を有するtransgenic mouseやknock out mouseに対して感染実験を試みている。 (4) E.disparの分布に関する疫学的検討:わが国のハイリスク集団におけるE.dispar感染の実態を明らかにするために、男性同性愛者と各種収容施設の入居者に対して血清反応および糞便内のアメーバを標的にしたPCRとモノクローナル抗体によるサンドイッチELISAを併用して調査を始めている。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] 牧岡朝夫: "Entamoeba invadens: Reversible effects of aphidicolin on the growth and encystation" Experimental Parasitology. 90.2. 294-297 (1998)
[Publications] 牧岡朝夫: "Effects of aphidicolin on Entamoeba histolytica growth and DNA synthesis" Journal of Parasitology. 84.5. 857-859 (1998)
[Publications] 小林正規: "Entamoeba dispar: Cultivation with sterilized Crithidia fasciculata" Journal of Eukaryotic Microbiology. 45.2. 3S-8S (1998)
[Publications] 野崎智義: "Cloning and bacterial espression of adenosine-5'-triphosphate sulfrylase from an enteric protozoan parasite,Entamoeba histolytyca" Biochmica et Biophysica Acta. 1429.2. 284-291 (1998)
[Publications] 野崎智義: "Molecular cloning and characterization of the genes encoding two isoforms of cystein synthase in Entamoeba histolytica" Molecular and Biochemical parasitology. 97.1. 33-44 (1998)
[Publications] 小林正規: "Inhibition of the in vitro growth of Entamoeba histolytica by semi-synthetized ailanthone derivatives" Antimicrobial Agents and Chemotherapy. (in press). (1999)

1998 Fiscal Year Annual Research Report

Entamoeba dispar感染に関する細胞生物学的,疫学的,臨床的研究

Principal Investigator

竹内 勤 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (00051847)

Research Products

[Publications] 牧岡 朝夫: "Entamoeba invadens: Reversible effects of aphidicolin on the growth and encystation" Experimental Parasitology. 90.2. 294-297 (1998)

[Publications] 牧岡 朝夫: "Effects of aphidicolin on Entamoeba histolytica growth and DNA synthesis" Journal of Parasitology. 84.5. 857-859 (1998)

[Publications] 小林 正規: "Entamoeba dispar: Cultivation with sterilized Crithidia fasciculata" Journal of Eukaryotic Microbiology. 45.2. 3S-8S (1998)

[Publications] 野崎 智義: "Cloning and bacterial espression of adenosine-5'-triphosphate sulfrylase from an enteric protozoan parasite,Entamoeba histolytyca" Biochmica et Biophysica Acta. 1429.2. 284-291 (1998)

[Publications] 野崎 智義: "Molecular cloning and characterization of the genes encoding two isoforms of cystein synthase in Entamoeba histolytica" Molecular and Biochemical parasitology. 97.1. 33-44 (1998)

[Publications] 小林 正規: "Inhibition of the in vitro growth of Entamoeba histolytica by semi-synthetized ailanthone derivatives" Antimicrobial Agents and Chemotherapy. (in press). (1999)

竹内勤慶應義塾大学, 医学部, 教授 (00051847)

[Publications] 牧岡朝夫: "Entamoeba invadens: Reversible effects of aphidicolin on the growth and encystation" Experimental Parasitology. 90.2. 294-297 (1998)

[Publications] 牧岡朝夫: "Effects of aphidicolin on Entamoeba histolytica growth and DNA synthesis" Journal of Parasitology. 84.5. 857-859 (1998)

[Publications] 小林正規: "Entamoeba dispar: Cultivation with sterilized Crithidia fasciculata" Journal of Eukaryotic Microbiology. 45.2. 3S-8S (1998)

[Publications] 野崎智義: "Cloning and bacterial espression of adenosine-5'-triphosphate sulfrylase from an enteric protozoan parasite,Entamoeba histolytyca" Biochmica et Biophysica Acta. 1429.2. 284-291 (1998)

[Publications] 野崎智義: "Molecular cloning and characterization of the genes encoding two isoforms of cystein synthase in Entamoeba histolytica" Molecular and Biochemical parasitology. 97.1. 33-44 (1998)

[Publications] 小林正規: "Inhibition of the in vitro growth of Entamoeba histolytica by semi-synthetized ailanthone derivatives" Antimicrobial Agents and Chemotherapy. (in press). (1999)