1997 Fiscal Year Annual Research Report
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09470260
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| Research Institution | National Cardiovascular Center Research Institute |
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Principal Investigator |
佐田 正晴 国立循環器病センター研究所, 実験治療開発部, 室長 (20162399)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
谷川 学 (株)CSKリサーチパーク, 開発推進部, 研究員
藤里 俊哉 国立循環器病センター研究所, 実験治療開発部, 室員 (60270732)
宮脇 富士夫 国立循環器病センター研究所, 実験治療開発部, 室長 (50174222)
辻 隆之 国立循環器病センター研究所, 実験治療開発部, 部長 (00075764)
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| Keywords | HLA-DQB遺伝子 / SLA-DQB遺伝子 / PCR-LiPA / genotyping / CSK系ミニブタ / NIHミニブタ |
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| Research Abstract |
CSK(ゲッチンゲン系)ミニブタの末梢白血球よりRNAを抽出し,λ-ZAP cDNA合成法にてSLA class II DQβ遺伝子のcDNAライブラリーの作成を行った。スクリーニングにより得られた陽性クローンの塩基配列を決定し,塩基配列より予想されるアミノ酸配列の推定を行った。得られたcDNAクローンはSLA-DQB遺伝子のsignal peptide,β1,β2,CY,TMの一部領域を含む261アミノ酸をコードしていた。HLA-DQB遺伝子のアミノ酸配列との比較から,SPでは33アミノ酸中16アミノ酸(48%),β1では53/83(64%),β2では90/105(86%),CYおよびTMでは27/31(87%)と非常に高い相同性を示した。アミノ酸配列が明らかにされているNIH系ミニブタのSLA-DQBc,-DQBdとCSK系ミニブタのアミノ配列の比較において,両者のアミノ酸配列はほぼ一致していることからβ1,β2domainは高度に保存されていることが確認された。HLA-DQB遺伝子2nd exon,1st domainを増幅するための3種類のprimer pairを用い,30頭のCSK(ゲッチンゲン系)ミニブタ末梢白血球より抽出した高分子DNAの増幅を行った。PCR産物を21種類のHLA-DQB probeとreverse-SSO法によりhybridizationさせSLA-DQB遺伝子のgenotypingの検討を行った。21probe中,5probeが5頭のPCR産物とhybridizationしたがSLA-DQB遺伝子の多型性の検出までには至らなかった。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] M.Sada: "Importance of HLA-DRB1 molecular matching based on three-dimensonal structure in cadaveric renl transplantation:A trial of new criterla for recipiant and donor selection" Transplanation Proceedings. 29,1. 1440-1442 (1997)
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[Publications] 佐田正晴: "臓器移植に応用可能なHLA class II genotyping法" 今日の移植. 10,2. 197-205 (1997)
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[Publications] 佐田正晴: "臓器移植と臨床検査:組織適合性検査" 臨床検査. 41,8. 873-879 (1997)
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[Publications] 辻隆之: "ミニブタ受精卵操作用3次元視顕微鏡システムの開発" BME. 11,10. 11-15 (1997)
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[Publications] T.Tuji: "Microinjection monitoring of minipig fertilized eggs with 3-D microscopes" Proceedings of the International Conference on New Frontlers in Biomechanical Engineering. 381-382 (1997)
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[Publications] M.M.Tongio: "Gentic diversity of HLA functional and medical implication" D.Charron, 1644 (1997)
