1999 Fiscal Year Annual Research Report

高等動物ペルオキシソーム形成因子群のクローニングと機能解析

Research Project

Project/Area Number	09480164
Research Institution	Himeji Institute of Technology
Principal Investigator	大隅隆姫路工業大学, 理学部, 教授 (50111787)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	塚本利朗姫路工業大学, 理学部, 助手 (30236864)
Keywords	ペルオキシソーム / ペルオキシソーム形成因子 / ペルコキシソーム欠損症 / GFP / PEX遺伝子 / Zellweger症候群
Research Abstract	ペルオキシソームは酵母からヒトに至るまで、真核生物一般に広く存在するオルガネラであり、脂肪酸の分解、種々の酸化反応など、多くの重要な代謝機能を担っている。ペルオキシソーム形成に関わる遺伝子(PEX遺伝子)としては20種類余りが明らかになっており、ヒトではそれらの欠損による遺伝疾患が知られている。そのような欠損細胞を正常遺伝子によって相補すると、ペルオキシソームが形成される。これらの細胞にはペルオキシソーム膜タンパク質を含むがマトリックスタンパク質を含まない、ゴーストとよばれる膜構造が存在する。遺伝子相補によって回復するペルオキシソームがゴーストから作られるのか、他のオルガネラから作られるのかは、ペルオキシソームそのものの由来に直結する問題である。そこで我々はPEX6遺伝子を欠損したCHO細胞(ZP92)に正常遺伝子を導入することによって、この問題に対するアプローチを試みた。ZP92にペルオキシソーム移行シグナルを付加したGFPを発現させると、サイトゾルに分散しているほかに、局所的に集積している像が認められた。この集積物はゴーストに近接して存在するが、ゴーストと同一のものではないことが、高解像度蛍光顕微鏡観察によって明らかになった。この状態の細胞に正常遺伝子を導入すると、これらの集積物はなくなり、GFPの蛍光は正常なペルオキシソームに認められた。この結果は、PEX6遺伝子の欠損によって、ゴーストとマトリックスタンパク質を含む構造とが正常に合体できなくなっていることを示しており、ペルオキシソーム形成過程の中間段階を反映していると考えられる。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Imanaka,Tsuneo: "Characterization of the 70-kDa peroxisomal membrane protein,an ATP binding cassette transporter"The Journal of Biological Chemistry. 274. 11968-11976 (1999)
[Publications] Shimozawa,Nobuyuki: "Nonsense and temperature-sensitive mutations in PEX13 are the cause of complementation group H of peroxisome biogenesis disorders"Human Molecular Genetics. 8. 1077-1083 (1999)
[Publications] Zhang,Zhongyi: "Genomic structure and idenification of 11 novel mutations of the PEX6(peroxisome assembly factor-2)gene in patients with peroxisome biogenesis disorders"Human Mutation. 13. 487-496 (1999)
[Publications] Shimozawa,Nobuyuki: "Functional Heterogeneity of C-Terminal Peroxisome Targeting Signal 1 in PEX5-Defective Patients"Biochemical and Biophysical Research Communications. 262. 504-508 (1999)
[Publications] Shimozawa,Nobuyuki: "Defective PEX gene products correlate with the protein import,biochemical abnormalities,and phenotypic heterogeneity in peroxisome biogenesis disorders"Journal of Medical Genetics. 36. 779-781 (1999)
[Publications] Yamasaki,Masatoshi: "Formation of peroxisomes from peroxisomal ghosts in a peroxisome-deficient mammalian cell mutant upon complementation by protein microinjection"The Journal of Biological Chemistry. 274. 35293-35296 (1999)

1999 Fiscal Year Annual Research Report

高等動物ペルオキシソーム形成因子群のクローニングと機能解析

Principal Investigator

大隅 隆 姫路工業大学, 理学部, 教授 (50111787)

Research Products

[Publications] Imanaka,Tsuneo: "Characterization of the 70-kDa peroxisomal membrane protein,an ATP binding cassette transporter"The Journal of Biological Chemistry. 274. 11968-11976 (1999)

[Publications] Shimozawa,Nobuyuki: "Nonsense and temperature-sensitive mutations in PEX13 are the cause of complementation group H of peroxisome biogenesis disorders"Human Molecular Genetics. 8. 1077-1083 (1999)

[Publications] Zhang,Zhongyi: "Genomic structure and idenification of 11 novel mutations of the PEX6(peroxisome assembly factor-2)gene in patients with peroxisome biogenesis disorders"Human Mutation. 13. 487-496 (1999)

[Publications] Shimozawa,Nobuyuki: "Functional Heterogeneity of C-Terminal Peroxisome Targeting Signal 1 in PEX5-Defective Patients"Biochemical and Biophysical Research Communications. 262. 504-508 (1999)

[Publications] Shimozawa,Nobuyuki: "Defective PEX gene products correlate with the protein import,biochemical abnormalities,and phenotypic heterogeneity in peroxisome biogenesis disorders"Journal of Medical Genetics. 36. 779-781 (1999)

[Publications] Yamasaki,Masatoshi: "Formation of peroxisomes from peroxisomal ghosts in a peroxisome-deficient mammalian cell mutant upon complementation by protein microinjection"The Journal of Biological Chemistry. 274. 35293-35296 (1999)

大隅隆姫路工業大学, 理学部, 教授 (50111787)