1998 Fiscal Year Annual Research Report
寒冷順化時の褐色脂肪細胞内Ca^<2+>変動のレーザー顕微鏡法,電極法による同時測定
Project/Area Number |
09670081
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Research Institution | Hyogo College of Medicine |
Principal Investigator |
中垣 育子 兵庫医科大学, 医学部, 講師 (90084904)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
堀 和子 兵庫医科大学, 医学部, 講師 (30068514)
辻田 純三 兵庫医科大学, 医学部, 講師 (30104235)
佐々木 貞雄 兵庫医科大学, 医学部, 助教授 (20104276)
堀 清記 兵庫医科大学, 医学部, 教授 (80068452)
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Keywords | 褐色脂肪細胞 / 寒冷馴化 / 非ふるえ熱産生 / Ca^<2+> / レーザー顕微鏡 / サーモジェニン / イオン |
Research Abstract |
寒冷および温暖馴化されたラットの肩甲骨間のラットより採取した褐色脂肪細胞に,Ca^<2+>の蛍光色素であるfluo-3をloadしたのち,レーザー顕微鏡でノルアドレナリン投与時のCa^<2+>濃度の変動を経時的に,空間的に測定した.また同様にH^+勾配提示色素(アクリジンオレンジ(AO))を用いてH^+勾配を測定した.また一方においてはX線微小部分析法を用いて細胞内イオン濃度の変動を測定した.また寒冷馴化による褐色脂肪細胞の電気生理的特性の変化,UCP産生の変化についても検討した.Fluo-3をloadした対照ラットおよび寒冷馴化ラットの褐色脂肪細胞にノルアドレナリンを投与すると細胞内のCa^<2+>の増加,核のCa^<2+>の減少が認められた.X線微小部分析法では寒冷馴化ラットの褐色脂肪細胞の核、ミトコンドリアでは対照ラットに比してNa濃度の増加,K,Cl濃度の低下が認められた.また寒冷馴化時ミトコンドリアのCaは上昇し,核の核膜に近い辺縁部のCaは低下した。またこの時核膜は一種の細胞内Ca貯蔵庫として機能する可能性も示唆された.寒冷馴化された褐色脂肪細胞のミトコンドリアに富む細胞質により強いAOの蛍光が見られた.これは寒冷馴化によって非ふるえ熱産生が亢進し,ミトコンドリアの内膜に高い形でのH^+の集積が増強されていると考えられる.褐色脂肪細胞よりtotalRNAを抽出すると,温暖馴化ラットに比して寒冷馴化されたラットのmRNAは3-4倍の発現を示した.このtransaiptをXenopusの卵に注入し,卵細胞膜の電流を測定すると電位依存性外向き電流を測定した.
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Nakagaki,I.,Hori,S.,Sasaki,S.,et al.: "Chages of the intracellular ion environment in cold acclimated brown adipocyle." (in preparation).
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[Publications] Sasaki,S.,Nakagaki,I.,Hori,S.,et al.: "Electrophysiological and electron microprobe studies of ion transport in cold acclimated brown adipocyte." (in preparation).
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[Publications] Nakagaki,I.,Tsai,Y.,Sasaki,S.,Yahata,T.,Kanoh,N.,Hori,S.et al.: "Ion mobilization of brown adipose tissue cell induced by cold acclimation." Jpn.J.Biometeor.35(3). S44, (1999)
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[Publications] Sasaki,S.,Nakagaki,I.,Tsujita,J.,Kaya,M.,Takemura,et al.: "The intracellular ion environment in cold acclimated brown adipocyte." Jpn.J.Physiol.,. (in press). (1998)
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[Publications] Nakagaki,I.,Sasaki,S.,Hori,S.,Yahaka,T.,Kuroshiro,A.: "Changes in intracellular electrolyte levels of brown adipocytes of cold acclimated rat." Third Congress of the Asian-Pacific Organization for cell Biology.Cell Struct.Funct.,. 23 Suppl.,. 165, (1998)
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[Publications] Sasaki,S.,Nakagaki,I.,Hori,S.,Yahata,T.,Kuroshima,A.et al.: "The effect of cold acclimation for ion envionment of brown adipose tissue cells." Jpn.J.Biometeor.34(3). S35, (1997)