1998 Fiscal Year Annual Research Report
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10307012
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
佐々木 毅 東北大学, 医学部, 教授 (50110656)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
石井 恵子 東北大学, 医学部・附属病院, 講師 (00291253)
亀岡 淳一 東北大学, 医学部, 助手 (30261621)
柴田 忍 東北大学, 医学部, 助手 (00271932)
舩渡 忠男 東北大学, 医学部・附属病院, 講師 (70165455)
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| Keywords | 慢性関節リウマチ / ヒトパルボウイルスB19 / TNFα / マクロファージ |
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| Research Abstract |
(1) これまでに慢性関節リウマチ(RA)例の病変部位である開節滑膜組繕において高頻度にヒトバルポウイルスB19(B19)DNA及びVP-1抗原の発現を認めた。このため同組織よりDNAを抽出し、PCRによりB19DNAを増幅した。
(2) 慢性関節リウマチ(RA)の10例関節より得られたB19DNA配列を解析したところ、アミノ酸置換を伴うmutationを見い出した。しかし、RA全例に共通し、かつB19による伝染性紅班例(非RA例)とは異った、RAに特異的なB19DNA配列を見い出すことはできなかった(RA例と伝染性紅班のB19にDNA配列において明らかな差を認めなかった)。
(3) RA関節滑膜細胞(SVC)をマクロファージ系細胞U937,TAP-1との混合培養を行うと、VP-1抗原陽性である(B19に感染した)U937又はTHP-1細胞を認めた。また培養上清中にB19DNAを検出できた(RA-SVCよりB19の分離)。これに基づき、B19持続感染クロンを得ることを目的としてB19陽性細胞を含むSVCについて限界希釈法によるクロン化を計ったが成功できなかった。
(4) B19のNS-1DNAをU937及びTHP-1にtransfectionした。我々が用いた系では亜鉛(Zn)により導入NS-1遺伝子が活性化される。本系でZn添加(NS-1遺伝子活性化)を行うことにより、NS-1mRNA発現と合わせて、宿主細胞でのTNFα-mRNAの発現増強が惹起された。
(5) RA-SVCより分離したB19の全長DNAを用いたRA-B19DNAトランスジェニックマウスを作成した。関節炎が惹起しうるが、現在は解析中である。
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[Publications] C.Murai,T.Sasaki,et al.: "Rheumatoid arthritis after human parvovirus B19 infection" Ann.Rheum.Dis. 58. 130-132 (1999)
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[Publications] Y.Katsube,T.Sasaki,et al.: "Analysis of κ light chain contribution to anti-DNA antibody activity of a human VH4-21-encoded monoclonal antibody (NE-1) by antibody-phage display technique" International Journal of Molecular Medicine. 1. 863-868 (1998)
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[Publications] Y.Takahashi,T.Sasaki,et al.: "Human parvovirus B19 as a causative agent for rheumatoid arthritis." Proc,Natl.Acad.Sci.USA. 95. 8227-8232 (1998)
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[Publications] Y.Munakata,T.Sasaki,et al.: "Somatic mutation in autoantibody-assiciated VH genes of circulating lgM+lgD+B cells." Eur.J.Immunol.28. 1435-1444 (1998)
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[Publications] Y.Takahashi,T.Sasaki,et al.: "Human parvovirus B19 in rheumatoid arthritis." Int.Review Immunol.17. 309-322 (1998)
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[Publications] 畠山百合子、佐々木毅ほか: "ヒトパルボウイルスB19の関節炎の診断-Empty Particle B19・PCRの有用性-" リウマチ. 38(5). 689-695 (1998)
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[Publications] C.A.Bona,T.Sasaki,et al.: "Comtemporary Immunology,Autoimmune Reactions" S.Paul(Human Press,Inc.), 15 (1998)
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[Publications] 佐々木毅: "最新医学 53" 最新医学社, 11 (1998)
