1999 Fiscal Year Annual Research Report
自己虹彩色素上皮細胞への遺伝子導入と移植による網膜疾患治療の基礎および臨床的研究
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10307041
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
玉井 信 東北大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (90004720)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
武田 宜之 東北大学, 医学部・附属病院, 助手 (40292338)
西川 真平 東北大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (90261635)
阿部 俊明 東北大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (90191858)
富田 浩史 東北大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (40302088)
布施 昇男 東北大学, 医学部・附属病院, 助手 (10302134)
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| Keywords | 色素上皮細胞 / 移植 / 加齢黄斑変性症 / 遺伝子導入 / サイトカイン |
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| Research Abstract |
(1)プラスミドベクターを用いて、視細胞変性に対して保護作用を有することが知られている塩基性繊維芽細胞増殖因子(bFGF)および脳由来神経栄養因子(BDNF)をラット虹彩より単離した培養虹彩色素上皮細胞に導入した。半定量的RT-PCR法により導入した遺伝子の発現量を解析した。導入した遺伝子は継代後も発現が維持されていることが確認できた。また、BDNFでは、ELISA法を用いてその発現タンパク量を調べた結果、5倍以上の発現が確認された。遺伝子導入細胞の性質について網膜色素上皮細胞の重要な機能である視細胞外節の貪食能を指標として調べた。その結果、虹彩色素上皮細胞の貪食能は、網膜色素上皮細胞の50%であったがbFGF遺伝子導入虹彩色素上皮細胞では網膜色素上皮細胞と同等、BDNF遺伝子導入虹彩色素上皮細胞では約4倍であった。(2)遺伝的に視細胞変性を来すRCSラットの網膜下にbFGF遺伝子を導入した虹彩色素上皮細胞を移植し、視細胞変性保護作用について検討した。その結果bFGF遺伝子を導入した虹彩色素上皮細胞を移植したラットにおいて、広範囲に視細胞の変性が抑制された。また、移植により保持された視細胞は光伝達に関するトランスデューシン遺伝子を発現していることが確認され、視細胞としての機能を保持している可能性が示された。(3)正常ラット硝子体内に種々のサイトカインを投与し、サイトカインの過剰発現による副作用を検討した。bFGFの硝子体内投与によって血管の走向異常がみられ、視細胞変性保護効果を有するものの、導入遺伝子としては適当でないと考えられた。
以上の基礎的な研究に加え、サルを用いて、自家虹彩色素上皮細胞移植による副作用研究を行い、1998年東北大学倫理委員会の承認を受け、自家虹彩色素上皮細胞移植の臨床応用を実施した。2000年2月現在で、27例の移植手術を行い、経過観察を行っている。移植による効果を判定するため、極低視力を評価するための機器(Low Vision evaluator)を開発した。様々なversion upを重ね、現在version6を用いて,経過観察を行っている(特許出願中)。
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[Publications] Udono T.: "Elevated adrenomedullin in the vitreous of patients with proliferative vitreoretinopathy"American Journal of Ophthalmology,. 128,. 765-767 (1999)
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[Publications] Yasuda K.: "Clinical course of acute zonal occult outer retinopathy in visual field and multifocal electroretinogram"British Journal of Ophthalmology. 83. 1089-1090 (1999)
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[Publications] Wada Y.: "Specular microscopic findings of cornmeal deposits in patients with Bietti's crystalline corneal retinal dystrophy"British Journal of Ophthalmology. 83. 1095 (1999)
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[Publications] Abe T.: "Characterization of iris pigment epithelial cell for auto cell transplantation"Cell Transplantation. 8. 501-510 (1999)
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[Publications] Abe T.: "Corneal endothelial changes and trinucleotide repeat expansion of DRPLA gene"British Journal of Ophthalmology. 83. 124-125 (1999)
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[Publications] Fuse N.: "Molecular cloning of cDNA encoding a novel microphthalmia-associated transcription factor isoform with a distinct amino-terminus"Journal of Biochemistry. 126. 1043-1051 (1999)
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[Publications] Abe T.: "Cytokine gene expression after subretinal transplantation"Tohoku Journal of Experimental Medicine. 189. 179-189 (1999)
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[Publications] Lu N.: "Quantitative analysis of leukocyte dynamics in retinal microcirculation of rats with short-term ischemia-reperfusion injury"Current Eye Research. 19. 403-410 (1999)
