BMP-2を用いた石灰化誘導機能を組み込んだ覆髄剤、断髄剤の開発

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 10470408
• Research Institution: Health Sciences University of Hokkaido
• Principal Investigator: 松田 浩一 北海道医療大学, 歯学部, 教授 (20109458)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 塚越 慎 北海道医療大学, 歯学部, 助手 (10236846) ; 斎藤 隆史 北海道医療大学, 歯学部, 講師 (40265070) ; 遠藤 一彦 北海道医療大学, 歯学部, 助教授 (70168821) ; 豊岡 広起 北海道医療大学, 歯学部, 助手 (30285530)
• Keywords: rhBMP-2 / コラーゲン / 多孔質ハイドロキシアパタイト / phosphophoryn / 象牙質

Research Abstract

rhBMP-2を用いた生体活性型覆髄剤を開発することを最終的な目標として、まず最初に、rhBMR-2の歯髄細胞の分化に対する影響を定量PCR法を用いてmRMAレベルでの検討を行った。抜歯直後の智歯より歯髄組織を摘出し、out-growth法にて歯髄細胞を得た。4-7代の歯髄細胞に無血清培養条件下で0,10,100,1000ng/mlのrhBMP-2を添加して、24時間後に、細胞を回収して、LightCycler(Roche, Germany)を用いて各種mRNAの発現を比較、検討した。その結果、rhBMP-2の濃度依存的に、象牙芽細胞のマーカーとして考えられているDentin Sialophosphoprotein mRNAの発現の上昇が認められた。すなわち、rhBMP-2の添加により、歯髄細胞から象牙芽細胞への分化促進が認められ、rhBMR-2を用いて効果的な歯髄保存療法剤を作ることができることが示唆された。次に、rhBMP-2の担体として1型コラーゲンと多孔質ハイドロキシアパタイトおよびco-factorとしてphosphophorynを用いてラット皮下結合組織内への移植、および頭蓋骨上への移植を行ったところ、コントロールと比較して旺盛な骨形成誘導が認められ、rhBMP-2/多孔質ハイドロキシアパタイト/1型コラーゲン/phosphophoryn複合体は効果的な覆髄剤となることが示唆された。

Research Products

• [Publications] 斎藤 隆史: "脱灰象牙質コラーゲンのin vitro石灰化に対する2-hydroxyethyl Methacrylate(HEMA)の影響"日本歯科保存学雑誌. 44・3. 630-636 (2001)
• [Publications] 伊藤 修一: "In vitroにおける結合型リンタンパク質による石灰化誘導-リンタンパク質濃度が界面張力に及ぼす影響-"日本歯科保存学雑誌. 44・1. 79-85 (2001)