1998 Fiscal Year Annual Research Report
PU.1によるマウス赤白血病細胞の分化抑制アポトーシスに関わる遺伝子の単離
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10670977
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| Research Institution | Sasaki Institute |
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Principal Investigator |
山田 俊幸 佐々木研究所, 細胞遺伝部, 主任研究員 (20183981)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
米山 ひとみ 佐々木研究所, 細胞遺伝部, 研究員 (30290977)
根岸 文子 佐々木研究所, 細胞遺伝部, 研究員 (40177902)
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| Keywords | PU.1 / 赤白血球 / 分化 / アポトーシス / Differential Display(DD)法 |
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| Research Abstract |
PU.1はEtsファミリーに属する転写因子であり、その活性化がマウス赤白血病(MEL)の発症に関与すると考えられている。我々はPU.1遺伝子の亜鉛誘導性発現べクターを導入したMEL細胞(PU.1細胞)に塩化亜鉛とともに分化誘導剤であるDMSOを投与すると、分化の誘導は起こらずアポトーシスが誘導されることを見い出し報告してきた。今回、これらの現象の誘導に伴い発現の変化する遺伝子の同定をDifferential Display(DD)法により試みた。塩化亜鉛とDMSOの同時投与前ならびに投与後24、48、72時間のPU.1細胞からRNAを抽出しDDを行った。シグナルに変化の見られたcDNA断片については、コントロールとして用いた細胞(塩化亜鉛あるいはDMSOを単独で投与したPU.1縦胞、および塩化亜鉛とDMSOを同時に投与したmock細胞)由来の対応するシグナルの変化と比較し、その変化が分化抑制およびアポトーシスの誘導時に特異的であることを確認した。上記の条件下で発現の変化するクローンは61であったが、そのうち24クローンは既知の遺伝子であり37クローンは未知の遺伝子であった。既知の24遺伝子のうち発現が増加したものは4遺伝子であり、その中にはmitochondrial tRNA geneなどが含まれていた。また発現が減少した20遺伝子のなかには、血球系細胞の増殖への関与が知られているnucleosome assembly protein 1(NAP-1)related geneや、神経系細胞の分化や機能に関与すると考えられているcerebellar degeneration related(cdr)gene 2,catechol O-methyltransferase(COMT)gene,monocarboxycylate transpoter(MCT1)gene,neural dfferentiation-associated gene,p205などが含まれていた。
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[Publications] F.Kihara-Negishi, et al: "Down-regulation of c-Myc and Bcl-2 gene expression in PU.1-induced Apoptosis in murine erythroleukemia cells" International Journal of Cancer. 76. 523-530 (1998)
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[Publications] N.Kondoh, et al: "Enhaced expression of the urokinase-type plasminogen activator gene and reduced colony formation in soft agar by ectopic expression of PU.1 in HT1080 human fibrosarcoma cells" British Journal of Cancer. 6. 718-723 (1998)
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[Publications] T.Yamada, et al: "Reduction of DNA binding activity of the GATA-1 transcription factor in the apoptotic process induced by overexpression of PU.1 in murine erythroleukemia cells" Experimental Cell Research. 245. 186-194 (1998)
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[Publications] H.Yamamoto, et al: "Physical and functional interactions between the transcription factor PU.1 and the coactivator CBP" Oncogene. 18. 1495-1501 (1999)
