植物病原菌類の感染器官分化の分子制御機構の解析

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11460150
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• Research Institution: Ibaraki University
• Principal Investigator: 阿久津 克己 茨城大学, 農学部, 教授 (10151002)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 中島 雅己 茨城大学, 農学部, 助手 (70301075)
• Keywords: Botrytis cinerea / 侵入器官分化 / 多細胞型付着器 / イノシン / サイクリックAMP / 多犯性病原菌 / 膜タンパク質 / 分子スイッチ

Research Abstract

灰色かび病菌(Botrytis cinerea)の侵入器官の一つである多細胞型の第二次付着器の形成機構を解明するために、その形態形成を誘導するイノシンおよびcyclicAMPの作用機構を解析することを試みた。イノシンは、病原性の異なる複数の菌株に対してin vitroおよびin vivo両条件下で付着器形成を誘導し、キュウリ葉への感染を促進した。CyclicAMPによる誘導効果はイノシンに比べて低いが、時間の経過とともに増大することが確認された。また、cyclicAMPは本菌菌体のcell free系でイノシンに代謝されることから、イノシンが付着器形態形成の誘導因子である可能性が示唆された。次に、生体分子間相互作用解析装置(IAsys)とSDS-PAGEの組合せによりイノシンに特異的に結合する菌体成分を検出した結果、細胞膜タンパク質分画中に複数存在することが見出された。そこで、cyclicAMPで前処理した菌体膜タンパク質分画からイノシンアフィニティーカラムを用いたアフィニティークロマトグラフィーによりイノシン結合タンパク質を精製・分取したところ、19kDの結合タンパク質が得られた。このタンパク質のN-末端アミノ酸配列を決定して相同検索した結果、今回得られたイノシン結合タンパク質は、生物のシグナル伝達系で分子スイッチとして機能するGTP-結合タンパク質と高い相同性が認められた。

Research Products

• [Publications] 吉田 愛ら: "Botrytis cinerea の付着器形成機構-イノシン結合タンパクについて-"日本植物病理学会報. 64・4. 347 (1999)
• [Publications] 喜多 真幸ら: "Botrytis cinerea の付着器形成に関与する遺伝子の探索"日本植物病理学会報. 64・4. 368 (1999)
• [Publications] 喜多 真幸ら: "Botrytis fabae からのクチナーゼおよびポリガラクツロナーゼ遺伝子の単離"日本植物病理学会大会(岡山大学). (発表予定). (2000)