コンジェニックラットの作成とそれによる舌癌感受性及び抵抗性遺伝子の解析

2000 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11470399
• Research Institution: Kagoshima University
• Principal Investigator: 北野 元生 鹿児島大学, 歯学部, 教授 (10142118)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 五味 暁憲 鹿児島大学, 歯学部, 助手 (10325798) ; 田沼 順一 鹿児島大学, 歯学部, 助手 (20305139) ; 仙波 伊知郎 鹿児島大学, 歯学部, 講師 (60145505)
• Keywords: Dark-Agouti系ラット / Wistar / Furth系ラット / ポジショナルクローニング / 4NQO誘発癌 / 舌癌感受性遺伝子 / 舌癌抵抗性遺伝子 / コンジェニックラット / ホモヘテロ

Research Abstract

我々は我々の開発した4-nitroquinoline 1-oxide(4NQO)誘発ラット舌癌モデルを用いてマッピングを試みたところ、既に舌癌発癌を促進または抑制するStc1やRtc1などの複数の遺伝子を見出すことができた。そこで我々はspeed congenic法により上記の遺伝子を基準ラットゲノムに導入し、それぞれの遺伝子の生物学的作用の解明とポジショナルクローニングを行うことを企図して本研究を開始した。具体的には、舌癌嫌発系のDark-Agoutiラットに由来する舌癌感受性遺伝子と考えられるStc1と、舌癌嫌発系のWistar/Furthラットに由来する舌癌抵抗性遺伝子と考えられるRtc1を別々にWistar/Furth(WF)ラット及びDark-Agouti(DA)ラットに交配を繰り返す手法を用い、両系ラット間でポリモルフィックなマイクロサテライトを含むマーカー遺伝子の検索(GD-RDA:genotypically direct-representational analysis)を行いながら導入実験を行った。N5ラットまでの作成は完了した。次に、N5ラット同志の交配によって、Stc1またはRtc1をホモで有すコシジェニックラットの作成を確認した後、その繁殖を待って発癌実験などにとり掛かった。現在鋭意本実験を続行中である。この実験結果によって、精緻な新たなマッピングが期待されよう。ヒトまたはマウスとのシンテニーから、導入遺伝子についての候補遺伝子が絞り込める可能性が大きい。

Research Products

• [Publications] Hirayama Y,Kitano M,Nagao M,Sugimura T,Ushijima T, et al: "Rare mutations of p53, Ki-ras, and β-catenin genes and absence of K-sam and cerbB-2 amplification in MNNG-induced rat stomach cancers"Mol Carcinogenesis. 25(1). 42-47 (1999)
• [Publications] Tanuma J,Kitano M,Shisa H,Hiai H.: "Polygenetic susceptibility and resistance to 4-nitroquinoline 1-oxide-induced tongue carcinomas in the rat"J Exp Animal Sci. 41(1). 68-77 (2000)
• [Publications] Kitano M,Tanuma J,Hirayama Y,Li T-J,Hirano M,Tomita I,Semba I.: "Green tea and rat tongue carcinogenesis (2): mutation of p53 gene during 4NQO-induced carcinogenesis in the Dark-Agouti rat"Reports of Kagoshima University Project : Interactive Studies on Food, Health and Environmental Sciences in Kagoshima. No.3. 137-141 (2000)
• [Publications] Kitano M.: "Host genes controlling the susceptibility and resistance to squamous cell carcinoma in a rat model"Pathol Intern. 50(5). 353-362 (2000)
• [Publications] Landini G,Hirayama Y,Li T-J,Kitano M.: "Increased fractal complexity of the epithelial-connective tissue interface in the tongue of 4NQO-treated rats"Pathol Res Pract. 196(4). 251-258 (2000)
• [Publications] Semba I,Ishigami T,Sugihara K,Kitano M: "Higher osteoclastic demineralization and highly mineralized cement lines with osteocalcin deposition in a mandibular cortical bone of autosomal dominant osteoptrosis type II : ultrastructural and undecalcified histological investigations"Bone. 27(3). 389-395 (2000)