CD4^+CD8^+胸腺細胞特異的単クローン抗体のリガンドの同定とその機能解析

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11670325
• Research Institution: Kyushu University
• Principal Investigator: 福井 宣規 九州大学, 生体防御医学研究所, 助教授 (60243961)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 白澤 専二 九州大学, 生体防御医学研究所, 助手 (10253535)
• Keywords: 胸腺内T細胞分化 / 単クローン抗体 / CD4^+CD8^+胸腺細胞 / TCR-MHC / ペプチド複合体相互作用 / アポトーシス / Thy-1

Research Abstract

CD4^+CD8^+胸腺細胞の大半は、TCR-MHC/ペプチド相互作用を欠くことより、正の選択を生き残れずアポトーシスに陥ると考えられているが、その分子機構は不明である。本研究では、我々が樹立したCD4^+CD8^+胸腺細胞特異的に、その約70%に反応する単クローン抗体1D11を用いて、その認識するリガンド(1D11-L)の同定及び機能解析を通じて、'default apotosis'の分子機構の解明を進めている。CD4^-CD8^-胸腺細胞をin vitroで分化させるとほとんどすべてのCD4^+CD8^+胸腺細胞が1D11で染色されるのに対して、抗CD3抗体でTCRを架橋するとその陽性率が著減した。また、TCRVβ3導入遺伝子とスーパー抗原であるMTV13のいずれか一方を発現するマウスのCD4^+CD8^+胸腺細胞の約70%は1D11で染色されるのに対して、両者を共に発現するマウスにおいてはその陽性率が著減した。以上より、1D11-Lは、TCR-MHC/ペプチド複合体相互作用を欠くCD4^+CD8^+胸腺細胞に特異的に発現すると考えられた。また、1D11-L^+CD4^+CD8^+細胞は、1D11-L^-CD4^+CD8^+細胞に比べ、アポトーシスに対する感受性が亢進していることを見いだした。1D11の反応性は抗Thy-1抗体により影響を受け、この知見を基に行った種々の実験結果より、1D11-Lはクラスターを形成したThy-1抗原であることが示唆された。共焦点レーザー顕微鏡により、胸腺細胞上のThy-1抗原の分布を観察すると、確かにCD4^+CD8^+細胞の一部で、Thy-1抗原がクラスターを形成していた。これらのことより、Thy-1抗原のクラスター形成が、TCR-MHC/ペプチド複合体相互作用を欠く結果生じる'default apoptosis'に関与していることが示唆された。

Research Products

• [Publications] Kawamura K. et al.: "Induction of autoimmune encephalitis by proteolipid protein 95-116-specific from HLA-DR2(DRB1*1502)transgenic mice"J. Clin. Invest.. (in press).
• [Publications] Nishimura H.. et al.: "MHC class II-dependent NK1.1^+γδT cells are induced in mice by Salmonella infection"J. Immunol.. 162. 1573-1581 (1999)
• [Publications] Sano T.et al.: "Spontaneous clustering of Thy-1 antigens CD4^+CD8^+ thymocytes lacking TCR engagement by MHC/peptide complexes"Eur. J. Immunol.. 29. 403-412 (1999)