新しいフロン代替物質1-ブロモプロパンの生殖毒性、神経毒性の作用機序に関する研究

1999 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 11670367
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 市原 学 名古屋大学, 医学部, 助教授 (90252238)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 柴田 英治 名古屋大学, 医学部, 助教授 (90206128) ; 那須 民江 信州大学, 医学部, 講師 (10020794) ; 竹内 康浩 名古屋大学, 医学部, 教授 (90022805) ; 山田 哲也 名古屋大学, 医学部, 助手 (90303635) ; 上島 通浩 名古屋大学, 医学部, 講師 (80281070)
• Keywords: 1-ブロモプロパン / クレアチンキナーゼ / スルフヒドリル基 / グルタチオン / 中枢神経 / 酵素免疫法 / ヒートショック蛋白 / 神経毒性

Research Abstract

32匹のWistar系雄ラットを8匹ずつ4群に分けた,3つの群には各々200ppm、400ppm、800ppmの1-BPを1日8時間、7日間曝露した。対照群には新鮮空気のみを与えた。曝露終了後大脳、小脳、脳幹、脊髄(横隔膜の高さより上位2センチ)中のCK、GOT、LDH活性および酵素免疫法によるCK-B、CK-M、Heal shock protein27濃度、ならびに蛋白SH基、非蛋白SH基。グルタチオンを測定した。SH基はエルマン試薬(DTNB)を用いて、総グルタチオンはEnzymatic cycling法によって測定した。対照群と各曝露群との比較はANOVAの後、ダネットの多重比較法を用いて行った。総CK活性は全部位で量依存的に低下した。酵素免疫法によるCK-B量は大脳では低下し、小脳では変化がなく、脳幹、脊髄では逆に増加した。大脳、小脳、脳幹では非蛋白SH基が量依存的に減少したが、総グルタチオンは大脳、小脳のみで有意な減少を示した。脊髄では非蛋白SH基、総グルタチオンは量依存的に増加した。蛋白SH基はいずれの部位でも有意な差は示さなかった。総CK活性が全ての部位で減少したにも関わらず、CK-B量は小脳、脳幹、脊髄においては減少をしめさなかった。唯一減少した大脳においても800ppmで総活性が40%の低下(対照比)であるのに対し、CK-B量は20%の低下であった。総活性の低下は、大脳では一部、他の部位ではほとんどが酵素阻害によることが示唆された。大脳、小脳、脳幹で非蛋白SH基が減少したのは、1-BPまたはその代謝物のSH基に対する修飾作用を示唆している。脊髄のみで非蛋白SH基とグルタチオンが増加した原因は不明である。蛋白SH基が変化しなかったことは、1-BPまたはその代謝物が生体内では蛋白のすべてのSH基に接近できないことを意味しているのかもしれない。

Research Products

• [Publications] Yu X,Ichihara G,Kitoh J et al: "Effect of inhalation exposure to 2-bromopropane on the nervous system in rats."Toxicology. 135. 87-93 (1999)
• [Publications] "2-Brompropane causes ovarian dysfunction by damaging primodial follicles and their oocytes in female rats."Toxicol Appl Permacol. 159. 185-193 (1999)