2000 Fiscal Year Annual Research Report
造血器腫瘍の染色体解析における染色体分染法に代わりうるSKY法の新たな応用・開発
Project/Area Number |
11671010
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Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
Principal Investigator |
嘉数 直樹 京都府立医科大学, 医学部, 助手 (20264757)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
阿部 達生 京都府立医科大学, 医学部, 教授 (60079746)
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Keywords | SKY法 / 造血器腫瘍 / 染色体解析 / 染色体分染法 |
Research Abstract |
SKY法は、染色体ペインティングプローブを用いている性質上、異なる染色体間の転座の検出には威力を発揮するが、同一の染色体内で起こる逆位や重複といった構造異常は、色調が変化せず検出することができない。また、転座染色体の由来は染色体単位では同定できても、バンド単位では決定できない。これらの限界を克服し、より精度の高い染色体解析を可能にするためには、染色体がG分染像と一致したバンド単位で、しかもおのおの異なる色調で識別・検出できる方法が最も理想的である。microdissection法を用いれば、顕微鏡下で分裂中期染色体の特定のGバンドと一致した染色体領域を切り出し、ゲノムDNAを抽出・精製することが可能である。われわれは、前年度の11番染色体に引き続いて、さらに改良を加え、3番染色体について全長をカバーする18のバンド特異的ゲノムDNAよりカラーバンドプローブを調製した。その結果、正常分裂中期染色体では、対応する3番染色体のGバンドパターンに一致して、各バンドが前年度よりも明瞭な固有の色調で識別可能なカラー分染像を得ることに成功した。本年度はまた、造血器腫瘍の臨床検体の染色体標本にも適用した。悪性リンパ腫の症例では、Gバンド上3番染色体短腕に1バンドサイズに相当する短い由来不明の染色体片の挿入を認めた。この方法で解析したところ3q13バンド由来であることが初めて同定できた。染色体異常についても、バンド単位で染色体由来を決定可能なことが示され、実際の染色体診断にも有用であることを明らかにした。
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[Publications] Yamaguchi-Iwai Y, et al.: "Mre11 is essential for the maintenance of chromosomal DNA in vertebrate cells"EMBO J. 18. 6619-6629 (1999)
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[Publications] Kakazu N, et al.: "Combined spectral karyotyping and DAPl banding analysis of chromosome abnormalities in myelodysplastic syndrome"Genes Chromosomes Cancer. 26. 336-345 (1999)
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[Publications] Kuroda J, et al.: "Aggressive natural killer cell leukemia/lymphoma : a comprehensive cytogenetic study by spectral karyotyping."Ann Hematol. 79. 519-522 (2000)
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[Publications] Kakazu N, et al.: "Characterization of complex chromosomal abnormalities in B-cell lymphoma by a combined spectral karyotyping (SKY) analysis and fluorescence in situ hybridization (FISH) using a 14q telomere probe"Am J Hematol. 65. 291-297 (2000)
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[Publications] Kakazu N, et al.: "Development of spectral color banding in cytogenetic analysis"Lancet. 357. 529-530 (2001)
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[Publications] Kakazu N, et al.: "Involvement of the NUP98 gene in a chromosomal translocation t(11;20)(p15;q11.2)in a patient with acute monocytic leukemia"Int J Hematol. (in press). (2001)
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[Publications] 嘉数直樹,阿部達生: "応用サイトメトリー SKY法"医学書院. 369 (2000)
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[Publications] 嘉数直樹: "造血器腫瘍アトラス SKY(spectral karyotyping)法"日本医事新報社. 284 (2000)