2001 Fiscal Year Annual Research Report
補欠分子族が異なるアミン類の酸化的脱アミノ酸素の種の多様性と機能的相関の解析
Project/Area Number |
11694212
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Research Institution | Yamaguchi University |
Principal Investigator |
足立 収生 山口大学, 農学部, 教授 (20027189)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
谷澤 克行 大阪大学, 産業科学研究部, 教授 (20133134)
外山 博英 山口大学, 農学部, 助教授 (60240884)
松下 一信 山口大学, 農学部, 教授 (50107736)
廣田 俊 名古屋大学, 理学部, 助手 (90283457)
広津 建 大阪市立大学, 理学部, 教授 (10047269)
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Keywords | アミン酸化酵素 / アミン脱水素酵素 / キノン補酵素 / キノプロテイン |
Research Abstract |
特筆される研究成果は全研究期間を通して懸案であったPseudomonas putida IFO 15366のアミン脱水素酵素のX線結晶構造解析が終了したことである。三種類の異なるサブユニットから構成されるキノヘモプロテインで、最小のサブユニットに活性中心が存在していることが、これまでの研究で明らかになっていた。X線結晶構造解析の結果、3つのアスパラギン酸またはグルタミン酸とシステインとの架橋結合が活性中心のシステイニルートリプトフィルキノンをとり囲む形の、きわめて新規なキノン補欠分子族であることが判明し、J. Biol. Chem.の近刊に発表したことである。これによって、アミン類の脱アミノ反応における補欠分子族は、TPQ, TTQに、新たにCTQが加えられることとなり、従来のPQQ, LTQとともにキノプロテインの構造、反応、種間の相違などを解明する手掛りが与えられた。キノプロテインのうちで、ヘムを含む酵素とヘムを含まない酵素の種間での違いや、反応機構にも大きな手掛かりを与えることとなった。 さらに、未知なキノヘモプロテインと推定されるCitrobacter freundiiのポリアミン脱水素酵素、Nocardioides simplexのヒスタミン脱水素酵素を単離・精製して、結晶解析を進めることができるところまで研究が進展した。チェコパラツキー大学の海外共同研究者たちは、植物のサイトキニン酸化酵素とアミノアルデヒト脱水素酵素を初めて単離・精製して、それらの特徴づけを行なって、新規な知見を集積することができた。これらの研究はキノン補欠分子族の形成機構へ研究の重点を移動させて、今後の新たな展開を促すことになる。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] I.Vancenberghe et al.: "The covalent structure of the small subunit from P. putida amine dehydrogenase reveals the presence of three novel types of internal cross-linkages"J.Biol.Chem.. 176. 42923-42931 (2001)
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[Publications] S.Datta et al.: "Structure of quinohemoporotein amine dehydrogenase with uncommon redox cofactor and highly unusual crosslinking"Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 98. 14268-14273 (2001)
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[Publications] S.Hirota et al.: "Observation of intermediates formed during the oxidative half-reaction of copper/topa quinone-phenethylamine oxidase"Biochemistry. 40. 15789-15796 (2001)
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[Publications] P.Galuszka et al.: "Cytokinin oxidase or dehydrogenase?"Eur.J.Biochem.. 268. 1-13 (2001)
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[Publications] K.Matsushita et al.: "Quinoprotein : structure, function, and biotechnological applications"Appl.Microbiol. Biotechnol.. 57. 1-19 (2002)
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[Publications] A.Satoh et al.: "Crystal structure of quinohemoprotein amine dehydrogenase from Pseudomonas putida"J.Biol.Chem.. 277. 2830-2834 (2002)