2000 Fiscal Year Annual Research Report
放射線アポトーシスにおけるチトクロームC遊離のチャネル機構
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12217090
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
藤原 美定 神戸大学, 医学部, 教授 (70030848)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田村 奈緒子 (堀 奈緒子) 神戸大学, 医学部, 助手 (50311783)
野田 朝男 神戸大学, 医学部, 講師 (40294227)
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| Keywords | 放射線 / アポトーシス / ミトコンドリア / チトクロームC遊離 / Bax / Bcl-XL / Bak / VDAC |
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| Research Abstract |
p53依存性放射線アポトーシスにおいてp53依存性にBaxが促進するチトクロームC(Cytc)遊離のミトコンドリア(MT)機構の解明を軸に、その他の細胞死促進Bak、Bidと細胞死抑制Bcl-2、Bcl-XLの作用も分析した。X線アポトーシスに高感受性なp53発現細胞(Black93、Molt-4白血病細胞)では5Gy照射後活性化されたリン酸化p53は細胞死抑制蛋白質Bcl-2の発現抑制と細胞死促進蛋白質Baxの発現促進を誘導したが、Bcl-XL、Bak、微量Bidの発現には影響しなかった。これら感受性細胞から照射後経時的分離された重いMT(HMT)ではBax蛋白質が経時的に転移増加したが、Bcl-XLとBcl-2蛋白質は減少し、Cytcが遊離された。照射後経時的に分離したHMTを免疫沈降した外膜VDACはBax、Bcl-XL、Bakと複合体を形成した。BaxはFITC-Cytcを内包したliposomeからCytcは遊離せず、また放射線アポトーシス抵抗性のp53(-)/Bax(-)Reh白血病細胞のHMTに形成されたBak/VDACヘテロ2量体はCytcを遊離しなかった。したがって、照射後形成されたHMTにおけるBax/VDACヘテロ複合体が機能的Cytc遊離チャネルであると考えられた。感受性細胞ではX線照射後の後期では内膜adenine nucleotide transporterや内外膜コンタクト部位のpermeability transition poreの開口によるMT膨張の構造異常とともに、内膜電位(ΔΨ)の低下、ROS産生、Cytc遊離が急激に進展した。したがって、p53依存性放射線アポトーシスでは初期Bax/VDACチャネルと後期MT破壊の2段階のCytc遊離機構が考えられた。
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Research Products
(3 results)
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[Publications] Noda,A.,: "A unique short sequence determines p53 gene basal and UV-inducible expression in normal human cells."Oncogene,. 19・1. 21-31 (2000)
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[Publications] Fujiwara,Y.,: "Bax/VDAC channel formation in and cytochorome c release from mitochondria during ionizing radiation-induced apoptosis"J.Radiat.Res.. 41・4. 409 (2000)
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[Publications] Hayashi,T.,: "Role of caspases and reactive oxygen in radiation-induced apoptosis : comparison with Fas-mediated apoptosis"J.Radiat.Res.. 41・4. 414 (2000)
