グループスタディによる小児肝癌の治療確立をめざした生物学的予後因子の研究

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12470372
• Research Institution: Chiba University
• Principal Investigator: 大沼 直躬 千葉大学, 大学院・医学研究院, 教授 (50125910)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 橋都 浩平 東京大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (50180815) ; 林 富 東北大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (40125638) ; 佐々木 文章 北海道大学, 大学院・医学研究科, 教授 (40178661) ; 中川原 章 千葉県がんセンター, 生化学研究部, 部長 (50117181) ; 檜山 英三 広島大学, 医学部・附属病院, 講師 (00218744)
• Keywords: 肝芽腫 / cDNA / hTERT / P-glycoprotein

Research Abstract

肝芽腫の発生、進展、予後に関与する遺伝子を同定し、新しい診断、治療法を開発することを目的として、肝芽腫および小児正常肝のcDNA libraryを作製してそれぞれ9000、3000クローンずつのエンドシークエンスを行った。クローニングされた遺伝子をプローブとして、肝芽腫8例と対応する小児正常肝の計16検体のcDNAを対象に半定量RT-PCRによるdifferential screeningを行ったところ、肝芽腫と小児正常肝とで発現差を認めた40の新規遺伝子は、肝芽腫で低く発現するものが多かった。また、肝芽腫で高く発現する癌遺伝子HBL0048は、他の様々な種類の癌細胞経でも高く発現しており、今後さらに角析を進めていく予定である。
肝芽腫48例を対象とし、ヒトテロメラーゼのcatalytic componentであるhTERT(human telomerase reverse transcriptase)の発現レベルを定量し、臨床的因子及び病理分類との関連を検討した。テロメラーゼ活性、hTERT発現量は病期の進行とともに、高発現腫瘍が増加し、死亡例で有意にテロメラーゼ活性度、hTERT発現量が高く、肝芽腫の悪性度の示標になる可能性が示唆された。
P-glycoprotein(P-gp)は各種悪性腫瘍において、その発現の亢進と薬剤耐性獲得の関連が報告されている。肝芽腫症例6例を対象にP-gp抗体を用いた免疫染色により発現を解析検討したところ、P-gpの発現はsyuyou非腫瘍肝では全体に均一に細胞膜に認められた。一方、腫瘍では胆汁排泄腔様構造の内腔を中心に、部分的不均一な発現を認めた。また、化学療法後切除標本で発現が上昇していた。肝芽腫でも他の悪性腫瘍と同様にP-gp発現と化学療法の関連が示唆された。

Research Products

• [Publications] Hajime Takayasu: "Frequent Deletions and Mutations of the s-Catenin Gene Are Associated with Overexpression of Cyclin D1 and Fibronectin and Poorly Differentiated Histology in Childhood Hepatoblastoma"Clinical Cancer Research. Vol.7. 901-908 (2001)
• [Publications] Fumiaki Sasaki: "Outcome of hepatoblastoma treated with JPLT protocol-1:A report from the Japanese Study Group for Pediatric Liver Tumor"Journal of Pediatric Surgery. (in press).