2000 Fiscal Year Annual Research Report
メカニカルストレスにより歯根膜に誘導される遺伝子群の解析
Project/Area Number |
12470460
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Research Institution | Okayama University |
Principal Investigator |
山本 照子 岡山大学, 歯学部, 教授 (00127250)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
宮本 学 岡山大学, 歯学部, 助手 (40252978)
上岡 寛 岡山大学, 歯学部・附属病院, 講師 (80253219)
山下 和夫 岡山大学, 歯学部, 助手 (50304316)
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Keywords | 歯根膜細胞 / メカニカルストレス / マイクロアレイ法 |
Research Abstract |
抜去歯から得たヒト歯根膜組織を直接Flex bottom plateにおき,細胞を遊離させsubconfluenceに達した細胞に対して伸展力によるメカニカルストレスを一定時間付与した。同一被験歯から得た組織片の細胞を対象として両者からtotal RNAを抽出し,cDNAに逆転写後radio isotopeで標識した。両者のmRNAの発現の違いをmicro array法を用いて約1100種類の既知遺伝子について解析した。メカニカルストレスにより発現が増強される遺伝子と,発現が抑制される遺伝子が同定された。一方,ヒト歯根膜の組織片から遊離してくる細胞を継代後Flex bottom plateに播種し,その細胞に対しメカニカルストレスを付与する同一の実験を行った。同様にメカニカルストレスのmRNA発現に対する影響をmicro array法により検討したところ,前述の結果をある程度反映しているものの,継代後の細胞はストレスに応答する遺伝子の数が少なく,その絶対的変化量も小さかった。これらよりヒト歯根膜細胞は,継代によりストレスに対する応答性が低下したクローンの選択がおこっていること,あるいは継代培養による細胞の老化がストレスに対する応答性を低下させている可能性が示唆された。次年度は現在までに報告されていないcytokine,growth factor様の遺伝子,signal pat hwayに関与する遺伝子を選択し,それらの遺伝子のメカニカルストレスに対する応答性をRT-PCR法により詳細に解析をすすめる予定である。
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[Publications] Yamashiro,T.: "Mechanical stimulation induces CTGF expression in rat osteocytes"Journal of Dental Research. (in press). (2001)
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[Publications] Kamioka,H.: "A three-dimensioned distribution of osteocyte processes revealed by the combination of CLS and DIC microscopy"Bone. 28・2(in press). (2001)
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[Publications] Yamashiro,T.: "Inferior alveolar nerve transection inhibits increase in osteoclast appearance during experimental tooth movement"Bone. 26・6. 663-669 (2000)
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[Publications] Yamashiro,T.: "Epithelieal rests of malassez expressed immunoreactivity of TrkA and its distribution is regulated by sensory nerve innervation"The Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 48・7. 979-984 (2000)
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[Publications] Yamashiro,T.: "Medullary monoamine levels during experimental tooth movement"Brain research. 878. 199-203 (2000)
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[Publications] Tsuboi,Y.: "Mitogenic effect of neurotrophins on periodontal ligament cell line"Journal of Dental Research. (in press). (2001)