2000 Fiscal Year Annual Research Report
PPAR-γ核内受容体分子を標的にした新しい膵癌治療
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12671213
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| Research Institution | Kanazawa University |
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Principal Investigator |
太田 哲生 金沢大学, 医学部, 助教授 (40194170)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
萱原 正都 金沢大学, 医学部, 講師 (60224705)
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| Keywords | PPAR-γ核内受容体 / thiazolidinedion(TZD) / 膵癌 / 大腸癌 / 分化誘導療法 / 足場非依存性増殖の抑制 / p21Waf1蛋白 / G1 growth arrest |
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| Research Abstract |
転写制御因子であるperoxisome proliferator activated receptor-γ(PPAR-γ)はretinoid X receptor(RXR)と二量体を形成し、それぞれのリガンド結合に依存してPPAR応答性部位とよばれる特異的なDNA塩基配列に選択的に結合し、主に脂肪細胞の分化に関与する核内受容体である。今年度は、消化器癌のなかでも大腸癌、胃癌、膵癌細胞に注目し、それらの癌細胞におけるPPAR-γの蛋白レベルでの発現程度を検索した。さらに、その特異的リガンドであるthiazolidinedion(TZD)処理による消化器癌細胞の増殖抑制効果についても検討した。[材料と方法]1)使用した癌細胞株について;ヒト大腸癌細胞5株(SW620,COLO320DM,HT29,SW480,DLD1)、膵癌細胞5株(Capan-1,AsPC-1,BxPC-3,Panc-1,MIAPaCa-2)、胃癌細胞5株(KATOIII,MKN-1,-7,-45,-74,)を使用した。2)PPAR-γ蛋白の発現について;各経代培養細胞株から蛋白を抽出してWestern blotting法、さらには免疫染色で細胞内局在についても観察した。なお、一次抗体としてanti-human PPAR-γ rabbit polyclonal antibody(Santa Cruz社製)を使用した。3)TZDによる増殖抑制効果について;PPAR-γの発現が確認された癌細胞株を用いて、足場非依存性増殖に関してclonogenic growth assay法で評価した。さらに4)p21Waf1蛋白誘導の有無と、5)flowcytometerによるcell cycleの解析も行った。[結果]PPAR-γ蛋白の強い発現は、大腸癌、膵癌のすべての株に認められたが、胃癌ではMKN-45のみであった。免疫染色では、癌細胞の核に一致して微細顆粒状の免疫反応物質が網状に分布していた。TZD処理により、癌細胞の増殖が濃度依存性に抑制され、clonogenic assayでのED50値は1-5μMであった。またp53 statusがmutant typeでもTZD処理によりp21Waf1蛋白の発現が容易に誘導され、flow cytometerでG1arrestの増殖抑制であることが確認された。さらに、TZD処理でAl-pやCEAなどの分化マーカの発現増強も認められた。[まとめ]以上の所見より、膵癌や大腸癌においてPPAR-γ核内受容体を標的にした新しい癌治療の可能性が示唆された。しかし、胃癌ではPPAR-γ蛋白を発現する細胞株は少なく、PPAR-γ核内受容体を標的にする癌治療には限界があると思われた。
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Research Products
(1 results)
