癌に特異的な前立腺特異抗原の性状解析と測定キットの開発

2001 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 12671528
• Research Institution: The Department of Urology, Faculty of Medicine, Shiga University of Medical Science
• Principal Investigator: 吉貴 達寛 滋賀医科大学, 医学部, 助教授 (80230704)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 金 哲將 滋賀医科大学, 医学部, 講師 (10204968) ; 岡本 圭生 滋賀医科大学, 医学部, 助手 (50303780) ; 若林 賢彦 滋賀医科大学, 医学部, 講師 (80191724) ; 片岡 晃 滋賀医科大学, 医学部, 助手 (80293835)
• Keywords: 前立腺癌 / 前立腺特異抗原 / 腫瘍マーカー

Research Abstract

前立腺特異抗原(PSA)は、前立腺癌の腫瘍マーカーとして極めて有効である。血液中では種々のタンパク質と結合しているComplexPSAと結合していないFree PSAが存在していることが見いだされ、その比率が前立腺癌の早期発見に有用でああることが認められている。両者の違いはPSAの分子種の多様性に起因していると考えられるが、その詳細については不明な点が多い。
本研究では、PSAの分子種の多様性を明らかにするために、二次元電気泳動法、飛行時間型質量分析計を用いたペプチドマスフィンガープリント法等のプロテオミクスの手法を用いて系統的かつ網羅的な解析を行った。その結果、20種類のPSAの分子種を同定してPSAプロテインカタログを作製することができた。それにより、今まで報告されていない切断点を持つ分子種を見つけることができ、また、糖鎖を持つ分子種においては糖鎖の多様性があることが解った。実際に臨床応用されているPSA測定キットに採用されているモノクローナル抗体を一次抗体として、二次元電気泳動法を組み合わせたウェスタンブロットを施行してみると、異なるキットの抗体は必ずしも同一のPSA分子群を認識しているのではないことが初めて判明した。すなわち、より前立腺癌に特異性が高いPSA分子群だけを認識する抗体と、そうでなく非癌性PSA分子群も認識してしまう抗体が存在した。このような抗体の特異性の相違を認識し、前者のような抗体を組み込んだキットだけを利用することによって、前立腺癌患者と肥大症患者の両方を含むいわゆるグレーゾーンと呼ばれるPSA値を示す患者群から、癌患者をより高い確率で選別することが可能になるかもしれない。更に、患者血清に対して同様のイムノブロットを行い、今回作製したカタログを用いて解析した結果、前立腺癌患者では、特定の切断点を持つ分子種が検出できないことが解った。