2001 Fiscal Year Annual Research Report
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12671756
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| Research Institution | Osaka Medical College |
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Principal Investigator |
上田 晃一 大阪医科大学, 医学部, 助教授 (90257858)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
吉田 龍太郎 大阪医科大学, 医学部, 助教授 (10124760)
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| Keywords | 再灌流障害 / マクロファージ / 皮弁 |
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| Research Abstract |
方法
(1)実験モデルの作成
Lewis ratの腹部に浅下腹壁動静脈を血管茎とする4×3cm大の島状皮弁を作成する。ダブルクリップを用いて血管茎の中枢と末梢の大腿動静脈をクランプする。虚血時間は10時間と11時間とし、虚血終了後、縫合糸を一部外してクリップを解除し、再灌流を行なう。
(2)セルソーターを用いた解析
クランプ解除後12時間、24時間、48時間、72時間の皮弁を母床の筋肉を含めて採取する。同部の細胞分画を単離し、fluorescein-labeled抗マクロファージ抗体で染色し、セルソーターを使ってpositiveな分画を精製する。その形態からマクロファージを確認する。
また、マクロファージの機能、貧食能を検討する。
(3)マクロファージの傷害機構における活性酸素量の測定
再灌流後12時間、24時間および48時間の皮弁組織中の活性酸素量を測定し、経時的な変化を捕え、マクロファージがどのような時期から関与しているか検討する。
結果
クランプ解除後48時間、72時間の皮弁にマクロファージのpositiveな分画を見いだした。また活発な機能、負食能を確認した。
活性酸素量は48時間にピークを認めた。
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